MODULACIÓN POR SALBUTAMOL (S) DE LA COLESTASIS INDUCIDA POR ESTRADIOL-17ß- GLUCURÓNIDO (E) EN DUPLAS AISLADAS DE HEPATOCITOS DE RATA (DAHR).

ZUCCHETTI, ANDRÉS ERNESTO; BAROSSO, ISMAEL; OCHOA, J.ELENA; CROCENZI, FERNANDO A.; SÁNCHEZ POZZI, ENRIQUE J

Mar del Plata, ARGENTINA

Congreso; LIV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)

AMPc previene de la colestasis por E. Los niveles hepáticos de AMPc son regulados, en parte, por agonistas adrenérgicos los cuales actúan mediante el receptor b2. En DAHR se evaluó laacción del agonista beta 2, S sobre la alteración por E de la función de los transportadores canaliculares Bsep y Mrp2. Se corroboró la participación del receptor beta 2 con el antagonista b2 adrenérgico butoxamina (B). Finalmente se estudió la dependencia de la protecciónde PKA (inhibidores KT5720 y H89) y de microtúbulos (inhibidor colchicina, C). Se obtuvieron DAHR por perfusión con colagenasa seguida de elutriación. Luego de 5 hs de cultivo serealizaron los siguientes experimentos: 1) Incubación 15min con S (10μM), seguido de incubación 20 min con E (50μM) o solvente y finalmente expuestas 15min a colil lisil fluoresceína (CLF, 2μM, sustrato de Bsep) y clorometil fluoresceína diacetato (CMFDA, 2,5μM, cuyo metabolito, GMF, es sustrato de Mrp2). Por microscopía de fluorescencia se determinó el porcentaje de DAHR que acumularon CLF (cvaCLF) o GMF (cvaGMF). 2) Preincubación 15min con B (5μM) y luego se siguió igual que en 1).3) Pre-incubación 30min con C (1μM) y luego se siguió igual que en 1). 4) Pre-incubación 15min con KT5720 (50nM) ó H89 (200nM) y luego se siguió igual que en 1). Resultados (media±ES): E redujo la cvaCLF y cvaGMF. S previno parcialmente, recuperandosignificativamente la reducción causada por E. B y C inhibieron la acción de S. En cambio KT5720 y H89 no inhibieron la acción de S. *VER TABLA CON RESULTADOS EN PDF ADJUNTOConclusión: S, protege parcialmente de la alteración funcional producida por E por un mecanismo en el que interviene el receptor adrenérgico beta 2. Este mecanismo es a su vez independientede PKA y dependiente de microtúbulos.