Expresión débil del antígeno D: estudio por biología molecular en donantes, pacientes y embarazadas del Centro Regional de Hemoterapia de Rosario.

STETLER S; SAYAGO M; GALLARDO V; NICOLORICH V; SOBOLEOSKY M; ACOSTA A; CARAVACA M; FORNES C; COTORRUELO C

Buenos Aires

Congreso; XVI Congreso Argentino de Medicina Transfusional; 2017

Asociación Argentina de Hemoterapia e Inmunohematología

Fundamento: el antígeno D del Sistema Rh puede presentar variaciones cualitativas (fenotipo D parcial) y cuantitativas (fenotipo D débil) en su expresión que en conjunto se denominan fenotipo D variante (Dvar). Este fenotipo se manifiesta a través de una intensidad reducida en las reacciones de hemaglutinación con antisueros anti-D. Algunos fenotipos Dvar son detectados en fase antiglobulina. Actualmente se considera que los pacientes con expresión débil del antígeno D, desarrollan una respuesta inmunológica luego de la exposición a glóbulos rojos D positivo. Sin embargo, numerosos estudios clínicos han demostrado que los individuos con fenotipo Dvar originado por los alelos D débil tipo 1, D débil tipo 2 y D débil tipo 3, no producen anticuerpos anti-D. Objetivo: el objetivo de este trabajo fue caracterizar a nivel molecular las muestras con expresión débil del antígeno D que fueron estudiadas en el Centro Regional de Hemoterapia de Rosario en los últimos 15 meses. Material y Métodos: se analizaron 49 muestras de sangre entera pertenecientes a donantes, pacientes con requerimiento transfusional y embarazadas con fenotipo Dvar detectado en fase antiglobulina o por una reacción débil de hemaglutinación en medio salino. Se determinó el fenotipo Rh completo utilizando anticuerpos monoclonales específicos anti-C, anti-c, anti-E y anti-e. Se obtuvo ADN genómico a través del método de salting-out. Se analizó por una estrategia de PCR multiplex la presencia del gen RHD. Se investigó la presencia de alelos D variantes por técnicas de PCR alelo específicas. Resultados: los estudios moleculares permitieron determinar que el 63,2% del total de las muestras con fenotipo Dvar portaban los alelos D débil tipo 1 (22,4%), D débil tipo 2 (30,6%) y D débil tipo 3 (10,2%). El 36,8% de las muestras analizadas resultaron portadoras de alelos D parciales (D débil tipo 4 (22,4%), RHD*359A (12,2%) y DVI tipo 2 (2,2%)). Se observó también que los alelos D débil tipo 1, D débil tipo 3 y DVI tipo 2 estaban asociados a la expresión del antígeno C, los alelos D débil tipo 2 y RHD*359A a la expresión del antígeno E mientras que el alelo D débil tipo 4 se asoció al fenotipo ccee. Conclusiones: los hallazgos obtenidos permiten concluir que en la población en estudio, más del 50% de los individuos con una expresión débil del antígeno D podrían ser considerados D positivos. Teniendo en cuenta que los pacientes y embarazadas con fenotipo Dvar portadores de alelos D débil tipo 1, D débil tipo 2 y D débil tipo 3 no son susceptibles de desarrollar anticuerpos anti-D, la caracterización molecular del fenotipo Dvar permite una optimización del uso de las unidades D negativas y de la profilaxis con inmunoglobulina anti D.