INTERACCION ENTRE PROTEINA BANDA 3 Y COMPLEJO RH EN GRSe

ENSINCK A; BIONDI C; GARCÍA BORRÁS S; RACCA L; COTORRUELO C; RACCA A

Rosario – Argentina

Congreso; VIII Congreso y XXVI Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2006

Sociedad de Biología de Rosario

La proteína Banda 3, de la membrana eritrocitaria presenta una fuerte interacción con el complejo Rh que contiene los polipéptdos Rh. Participa en la formación del antígeno de senescencia que induce la unión de anticuerpos autólogos y la remoción selectiva de glóbulos rojos senescentes (GRSe) de la circulación. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la interacción entre la proteína Banda 3 y el Complejo Rh en GRSe. Se procesaron muestras de sangre periférica (n=20) de grupo sanguíneo O RhD positivo, de dadores voluntarios con serología negativa. La sangre anticoagulada con ACD fue sometida a centrifugación diferencial en gradiente de densidad, para obtener GRSe en el botón celular y GR jóvenes (J) en la capa superior. En estas suspensiones eritrocitarias se estudió su capacidad reaccionante frente a diluciones geométricas de un antisuero anti-D de clase IgG. Se determinó el título y score en las muestras de sangre entera y en todas las subpoblaciones de GRSe y GRJ por técnicas de hemaglutinación. Paralelamente se realizó el ensayo de monocapa de monocitos con distintas suspensiones eritrocitarias: GRSe, GRJ, GRSe sensibilizados con  anti-D de clase IgG (S) y GRJS. Se determinó el % de monocitos activos (MA) considerando las células que tienen adheridos y/o fagocitados hematíes. Se utilizaron controles negativos: GR normales (GRN) y positivos: GR O Rh D + sensibilizados (GRS). Los títulos obtenidos en el estudio de reactividad del antígeno D fueron los siguientes: Sangre entera: 448.0 ± 115.8; GRJ: 245.3 ± 101.5; GRSe: 853.3 ± 252.1. Los valores hallados en las muestras de sangre total son significativamente mayores que los observados en GRJ (p < 0.001) y menores a los obtenidos con GRSe (p < 0.05). No se observaron modificaciones en los valores del score en los 3 grupos analizados. Los % de MA con las distintas suspensiones eritrocitarias fueron: los siguientes: GRSe: 17.1 ± 1.5; GRJ: 3.1 ± 0.9; GRSeS: 34.4 ± 1.8; GRJS: 28.5 ± 1.7; GRN: 2.7 ± 0.8 ; GRS: 30.1 ± 1.9. Se aplicó el test de ANOVA y comparaciones múltiples para analizar la variable diferencia entre los % de MA obtenidos con las distintas suspensiones eritrocitarias. Los % de MA encontrados en este modelo in vitro fueron significativamente mayores (p < 0.05) con GRSeS que los hallados con GRSe y con GRS. Estos hallazgos podrían atribuirse a modificaciones conformacionales de la proteína Banda 3 durante el envejecimiento eritrocitario que producirían una mayor interaccción con anticuerpos dirigidos a epitopes del complejo RH.