INVESTIGADORES
COTORRUELO Carlos Miguel
congresos y reuniones científicas
Título:
INVESTIGACION DEL POLIMORFISMO MOLECULAR DEL FENOTIPO D VARIANTE
Autor/es:
TRUCCO BOGGIONE C; PERCARA L; LUJÁN M; BIONDI C; COTORRUELO C
Lugar:
Zavalla
Reunión:
Congreso; XV Congreso y XXXIII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2013
Institución organizadora:
Sociedad de Biología de Rosario
Resumen:
El gen RHD codifica la proteína transmembranal RhD
que expresa los epitopes del antígeno D del sistema Rh. Numerosas variantes alélicas
son responsables de una expresión alterada del antígeno D (variante D) que se manifiesta a través de una intensidad reducida en
la reacción de hemaglutinación con anti-D. Actualmente en los bancos de sangre,
se considera que los pacientes con expresión aberrante de dicho antígeno,
desarrollan una respuesta inmunológica luego de la transfusión de glóbulos
rojos D positivo. Sin embargo, estudios recientes han demostrado que los
receptores portadores de alelos D débiles
tipo 1, tipo 2 y tipo 3, no producen anticuerpos anti-D. El objetivo de este
trabajo fue investigar las bases moleculares responsables del fenotipo D
variante en muestras de pacientes de nuestra ciudad y
derivadas de diferentes efectores de salud del país. Se estudiaron 116 muestras
provenientes de pacientes de Rosario (n=44), Tucumán (n=39),
La Plata (n=14) y Córdoba (n=19). Se determinó el fenotipo Rh
completo por técnicas de hemaglutinación utilizando anticuerpos monoclonales
específicos. Se obtuvo ADN genómico a través del método de salting-out. Se analizó por una estrategia de PCR multiplex la presencia
del gen RHD. Posteriormente, se
amplificaron por PCR alelo específica cada uno de los diez exones del gen RHD, se investigó la presencia de las
variantes alélicas D débiles tipo 1, 2, 3
y 4 y de la variante DVII. En las muestras no caracterizadas se
secuenciaron los diez exones del gen RHD.
Los estudios moleculares permitieron determinar que el 54,31% del total de las
muestras portaban los alelos D débiles
tipo 1, tipo 2 y tipo 3. En las regiones de Córdoba, La
Plata y Rosario se observó que en más del 50% de las muestras, el fenotipo D
variante es producto de dichos alelos. En Tucumán, la frecuencia de las
variantes D débiles tipo 1, tipo 2 y tipo 3 es menor (28,20%) y se observó una
mayor variabilidad alélica. Por otro lado, en las ciudades de Córdoba y Tucumán
las muestras portadoras del alelo D débil
tipo 4 representaron un porcentaje mayor que en Rosario y La Plata. Estos resultados
sugieren que la distribución de los alelos del sistema Rh varía en las
diferentes regiones de la Argentina. El predominio de alelos D débiles tipo 1, 2 y 3, característicos de
caucásicos europeos, indicaría el mayor aporte de esta etnia al acervo genético
de los individuos de la región central del país. Además, la presencia del alelo D
débil tipo 4, de alta frecuencia en individuos africanos, fue superior en
Tucumán y Córdoba sugiriendo una mayor influencia del África Subsahariana en
esta población. La elevada variabilidad alélica observada en Tucumán podría
explicarse por un mayor aporte amerindio. La detección molecular de las variantes
D débil tipo 1, tipo 2 y tipo 3 permitirá un mejor manejo de la unidades D
negativas y un uso racional de la profilaxis con IgG anti-D. El estudio
molecular del locus RH resulta importante para desarrollar estrategias
de tipificación de ADN confiables, que permitan realizar la genotipificación RHD
prenatal y optimizar la selección de unidades a transfundir en los Bancos
de Sangre.