Expresión de CD44 en células epiteliales de saliva

ENSINCK A; LEBENSOHN N; CAMPI C; GARCÍA BORRÁS S; RACCA A; COTORRUELO C; BIONDI C

Rosario

Congreso; XII Congreso. XXX Reunión Anual. Sociedad de Biología de Rosario; 2010

Sociedad de Biología de Rosario

La proteína CD44 participa en las funciones normales de las células. Se ha descripto que en algunos tejidos neoplásicos se encuentra sobreexpresada y aparece con distintas isoformas, sugiriendo que se encuentra involucrada en la generación tumoral. Esta proteína y su forma alterada aparecen en los fluidos corporales. El objetivo de este trabajo fue investigar por microscopia confocal, la expresión de la proteína CD44 en células epiteliales obtenidas de muestras de saliva de pacientes con lesiones orales. Se estudiaron 28 individuos, con diferentes lesiones orales (benignas, pre-cancerosas y cancerosas), y un grupo de individuos control (n=32) que no presentaban alteraciones. Se trabajó con muestras de saliva sometidas a choque térmico y lavadas con tampón fosfato salino (PBS). Las mismas fueron concentradas por centrifugación.; posteriormente 106 células fueron incubadas con el anticuerpo anti-CD44 diluido convenientemente, durante 30 min a temperatura ambiente. Luego de un lavado con PBS, se incubó con un anticuerpo secundario marcado con aloficocianina (APC). Paralelamente se procesaron los controles internos de cada muestra. Las diferentes suspensiones celulares fueron lavadas con PBS y observadas por microscopía confocal (Nikon C1), utilizando láser rojo 639 nm. Las imágenes obtenidas fueron procesadas con el programa EZ.C1 Gold.Version 3.70. Los resultados hallados mostraron fluorescencia correspondiente a la presencia de la proteína CD44 en las muestras de los pacientes con diagnóstico de cáncer y precáncer. Una mayor intensidad se observó en aquellos individuos con diagnóstico anatomopatológico de carcinoma de células escamosas. En cambio, las muestras provenientes de pacientes con lesiones benignas no presentaron imágenes de fluorescencia como las muestras del grupo control. Estos hallazgos indican que la sobreexpresión de la molécula CD44 analizada podría ser considerada como marcador de riesgo en individuos que presentan lesiones orales. Aunque esta metodología utiliza instrumental de alto costo, podría ser una herramienta complementaria para la demostración de la sobreexpresión de la proteína CD44 en pacientes que presentan lesiones orales premalignas y malignas.