Expresión de CD55 y CD59 en el envejecimiento eritrocitario

ENSINCK A; LUJÁN BRAJOVICH M; MATTALONI S; COTORRUELO C; BIONDI C

Virtual

Congreso; XVIII Congreso Argentino de Medicina Transfusional; 2021

Asociación Argentina de Hemoterapia, Inmunohematología y Terapia Celular

Fundamentos: Los glóbulos rojos (GRs) están protegidos de la lisis mediada por el sistema del complemento, por la presencia en la superficie de proteínas que regulan su actividad. El factor acelerador del decaimiento (CD55) es una proteína anclada en glicosilfosfatidilinositol (GPI) transportadora del sistema de grupo sanguíneo Cromer que inhibe la escisión de C3 y C5 al activar la desintegración de las convertasas C3 y C5. El sistema de grupo sanguíneo CD59 es una GPI que se une a los componentes del complemento C8 y C9, protegiendo a los eritrocitos del ataque del complemento mediante la inhibición de la formación del complejo de ataque a la membrana. El estudio de los cambios en la expresión de moléculas de la superficie de los GRs podrían aportar nuevos enfoques sobre el envejecimiento y los factores involucrados en la eliminación de células senescentes.Objetivos: El objetivo de este trabajo fue evaluar los niveles de expresión de CD55 y CD59 en GRs de diferentes edades: GR senescentes (Se) y GR jóvenes (J) en sangre entera.Materiales y Métodos: Se estudió la expresión de CD55 y CD59 en los GRs por citometría de flujo mediante la información obtenida de los parámetros de dispersión de luz forward scatter (FSC) y side scatter (SSC) e intensidad de fluorescencia (IF). Al adquirir una muestra de GRs sin paso previo de separación de poblaciones etáreas, consideramos que la población de GRSe se encuentra en la zona de menor FSC y mayor dispersión de SSC, mientras que la fracción de GRJ estaría ubicada en la región de mayor FSC y SSC más homogéneo. Se obtuvieron muestras de sangre venosa periférica anticoagulada con ACD de donantes voluntarios normales (n = 30), se utilizó un citómetro de flujo FACSAria II (BD) y el programa adquisición y análisis FACSDiva (BD). 50 μL de una suspensión de GRs se incubaron con 10 μL de anti-CD55 conjugado con ficoeritrina (clon IA10, BD) y anti-CD59 conjugado con isotiocianato de fluoresceina (clon p282 (H19), BD). Luego de incubación, se realizó un lavado con PBS y las células fueron resuspendidas en diluyente FACSFlow. Las poblaciones eritrocitarias fueron seleccionadas en un dot-plot FSC/SSC en escala logarítmica.Resultados: Los niveles de expresión de CD55 y CD59 son significativamente diferentes en las dos poblaciones estudiadas. Los valores promedios de la intensidad de fluorescencia media (IFM) de CD55 en GRSe (1211,0 ±274,34) fue significativamente menor que la obtenida para los GRJ (1395,4 ± 342,18) (p