Participación de la expresión de fosfatidilserina en la remoción eritrocitara en pacientes con anemias hemolíticas congénitas

ENSINCK A; LUJÁN BRAJOVICH M; MATTALONI S; ACOSTA L; COTORRUELO C; BIONDI C

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Congreso; IV Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2020

Sociedad Argentina de Biología

La pérdida de la asimetría de fosfolípidos y la exposición de fosfatidilserina (FS) en la superficie de la membrana de los glóbulos rojos (GRs) actúa como una señal de muerte eritrocitaria o eriptosis, importante para el reconocimiento y la eliminación de células de la circulación sanguínea. Diversos estudios sugieren que los GRs de pacientes con Anemias Hemolíticas Congénitas (AHC) estarían sometidos a instancias de aceleración del envejecimiento. El objetivo del presente trabajo fue analizar la expresión de FS en poblaciones de GRs Jóvenes (J) y Senescentes (Se) en muestras de sangre periférica (SP) de pacientes con AHC, utilizando citometría de flujo. Se estudiaron 19 muestras de pacientes con distintas AHC: 2 con Anemia Hemolítica (AH) HbA/C, 1 HbS/C, 1 HbA/S, 1 ADA, 2 Deficiencia de G6PD, 1 HbH, 2 αo. Med, 2 Hb A/C Harlem, 1 AH no caracterizada esplenectomizado, 4 Esferosictosis Hereditaria (EH), 1 Hb Lepore y 1 con α Talasemia3.7/ HbS. Como referencia se analizaron 20 muestras de SP de dadores del Servicio de Hemoterapia del Hospital Provincial del Centenario. 25 μL de GRs al 0,2% fueron incubados con 5 μL de anexina V (AV)-PE según indicaciones del kit PE Annexin V Apoptosis Detection Kit I.BD. Como control negativo se utilizaron GRs sin marcar y como control positivo GRs permeabilizados con etanol 50%. Se utilizó un citómetro FACSAriaII y el programa FACSDiva para la adquisición y análisis. Las poblaciones de GRs fueron seleccionadas en un dot-plot FSC/SSC en escala logarítmica. Teniendo en cuenta que FSC representa el tamaño celular y SSC la complejidad celular interna; asumimos que la población de GRSe se encuentra en la zona de < FSC y > SSC. En la población de referencia, el % de células AV+ en GRSe (1,10±0,50) fue significativamente mayor que para GRJ (0,15±0,10) (p