Redes transcripcionales asociadas a los factores de transcripción NF-Y y SIN1 en la interacción simbiótica entre Phaseolus vulgaris y Rhizobium etli

ZANETTI, MARÍA EUGENIA; GRECO, MICAELA; CLÚA, JOAQUÍN; BLANCO, FLAVIO

Simposio; Simposio de Genómica Funcional de Plantas; 2017

Las plantas leguminosas son capaces de establecer una simbiosis con bacterias fijadoras de nitrógeno. Este proceso involucra una compleja vía de transducción de señales que comienza con la activación de receptores de membrana y culmina con la activación jerárquica de factores de transcripción que disparan el programa genético requerido para la formación de un nuevo órgano en la raíz de la planta llamado nódulo, donde ocurre la fijación de nitrógeno. Las subunidades A1 y C1 del factor de transcripción heterotrimérico NF-Y y el factor de transcripción de la familia GRAS SIN1, forman un complejo transcripcional requerido para la infección bacteriana y la organogénesis del nódulo. Plantas silenciadas en estos genes mediante RNAi muestran una marcada disminución en el tamaño de los nódulos y niveles reducidos en la expresión de mRNAs que codifican proteínas del ciclo celular. Con el objetivo de determinar las redes transcripcionales reguladas por NF-Y y SIN1 a escala genómica, hemos abordado ensayos de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) seguido de secuenciación masiva (ChIP-seq) a partir de plantas que sobreexpresan los factores de transcripción fusionados al epitope FLAG. Paralelamente, hemos analizado las regiones promotoras de genes del ciclo celular de P. vulgaris en busca de la secuencia consenso CCAAT, la cual es reconocida por NF-Y. Mediante ensayos de ChIP seguidos de PCR hemos determinado que NF-YC1 se encuentra asociado al promotor del gen de una proteína quinasa dependiente de ciclinas, CdkB, confirmando la hipótesis de que NF-Y promueve la organogénesis del nódulo a través de la activación de genes del ciclo celular.