Evaluación de la prevalencia de la variante del gen PDK4 en una población de Doberman Pinscher de Argentina y su asociación con el desarrollo de Cardiomiopatía Dilatada

BATISTA, P.R.; GARCES, G; ARIZMENDI, A; BARRENA, JP; RE, N; GIOVAMBATTISTA, G

CABA

Congreso; XX Congreso Nacional de AVEACA; 2020

AVEACA (Asociación de Veterinarios Especialistas enAnim de Comp de Arg)

Introducción:La cardiomiopatía dilatada (CMD) en el Doberman Pinscher (DP) es una enfermedad poligénica, heredada como un rasgo autosómico dominante con penetrancia incompleta. Se reportó una asociación entre la deleción de 16 pares de bases (16-pb) en el sitio de empalme 5´ del intrón 10, del gen de la piruvato deshidrogenasa quinasa, isoenzima 4 (PDK4), ubicado en el cromosoma 14 y el desarrollo de CMD en una población de DP de Estados Unidos (CITA). En cambio, no se encontró evidencia de dicha asociación otra población de DP de Europa (CITA). Los objetivos de este estudio fueron estimar la prevalencia de la variante (del) del gen PDK4 y determinar su asociación con el desarrollo de CMD en una cohorte de DP de Argentina.Materiales y métodos:Se incluyeron en este estudio un total de 134 DP (58 machos y 76 hembras) de entre 4 y 15 años de edad. En base a la evaluación clínica y ecocardiográfica, los perros se clasificaron en dos grupos: 1) CMD (n=20, ≥4 años, diámetro diastólico del ventrículo izquierdo ≥49 mm y diámetro sistólico del ventrículo izquierdo ≥42 mm), y 2) control (n=45, ≥7 años, sin hallazgos clínicos, eléctricos ni morfológicos). Los 69 DP restantes no se incluyeron en ninguno de los grupos, ya que no cumplían con los criterios de inclusión establecidos. De acuerdo con la variante informada en el gen PDK4 (CFA14: g.20,829,667_20,829,682del; genoma CanFam 3.1), se diseñaron los primers para amplificar un fragmento que incluyera la deleción del sitio de empalme (forward primer, 5′-GTTTTGGTTATGGCTTACCAATT-3 ´ y reverse primer, 5′-ATGGACTCTCTCTCTCTCAAATA-3 ′). Se obtuvieron amplicones de 210pb para el alelo salvaje (ins) y 194pb para el alelo mutado (del) a partir de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). El genotipo de cada animal se determinó mediante electroforesis en gel de agarosa al 1%. Finalmente, los fragmentos obtenidos se secuenciaron con el analizador genético ABI 3500 (Applied Biosystems). A partir de la totalidad de los perros muestreados se calculó la prevalencia del alelo mutado. Asimismo, se determinó la asociación entre la presencia del mismo y el desarrollo de CMD mediante una prueba exacta de Fisher con la función odds ratio del paquete de herramientas de R. Se estableció la significancia en P