MADURACIÓN DE OVOCITOS BOVINOS Y NIVELES DE ZINC INTRACELULARES: INFLUENCIA DE TRES HORMONAS REPRODUCTIVAS

NIKOLOFF N; FURNUS C; CARRANZA A; ANCHORDOQUY JM; PASCUA M; ANCHORDOQUY JP

Córdoba

Simposio; 12° Simposio Internacional de Reproducción Animal; 2017

IRAC - BIOGEN

El zinc (Zn) es un micronutriente de función esencial en los seres vivos e interviene en un amplio número de procesos celulares. En el ovocito, la biodisponibilidad de Zn y su ingreso y salida resultan fundamentales para la activación y reanudación de su ciclo celular. Sin embargo, los mecanismos que regulan la homeostasis del Zn en el complejo ovocito-cúmulus (COC) de la hembra bovina han sido poco estudiados. En este marco, se evaluó el efecto de tres hormonas fundamentales en el proceso de maduración del COC [estradiol (E2), folículo estimulante (FSH) y luteneizante (LH)] sobre la concentración de Zn intracelular en el ovocito. Para ello, se maduraron COCs durante 24 horas en: (1a) Medio de MIV suplementado con hormonas (E2 1µg/ml, FSH 1µg/ml, LH 10 µg/ml) y 120 µg/dl Zn [concentración adecuada según escala de Kincaid (1999)] y (1b) Medio de MIV suplementado con hormonas en ausencia de Zn. Además, se realizaron controles sin hormonas: (2a) Medio de MIV suplementado con 120 µg/dl Zn y (2b) Medio de MIV sin Zn. Luego de la MIV, se separaron las células del cúmulus y se analizó la concentración intracelular de Zn en los ovocitos de cada grupo experimental por medio de la técnica del indicador FluoZin-3. El análisis y la comparación de la intensidad de la fluorescencia se realizaron mediante el software ImageJ. El estudio estadístico de los datos se realizó mediante una regresión lineal mixta con el procedimiento MIXED de SAS 9.0 (SAS Inst. Inc.). Los niveles de fluorescencia de mayor intensidad, que corresponden a los mayores niveles de concentración de Zn, se registraron en los ovocitos madurados en medio sin hormonas y en presencia de Zn, siendo este tratamiento significativamente distinto de los tres restantes (p≤0,02). En segundo nivel de intensidad se ubicaron aquellos ovocitos madurados con hormonas y Zn. En ausencia de Zn, las concentraciones intracelulares de este mineral fueron menores pero similares en los ovocitos madurados en presencia o ausencia de hormonas. No se registraron diferencias significativas entre estos últimos tres tratamientos (1b, 2ª y 2b; p>0,05). Estos resultados sugieren que la homeostasis del Zn en el ovocito maduro estaría modulada por la acción hormonal, aparentemente por un mecanismo inhibitorio de la concentración intracelular. Este estudio respalda datos obtenidos previamente en nuestro laboratorio con respecto a la regulación de la entrada y salida de Zn, los cuales mostraron una modulación en la expresión génica de los transportadores del mineral tanto en ovocitos como en células del cúmulus debido a la acción hormonal.