EFECTO DE MINERALES TRAZA SOBRE LA UNIÓN ESPERMATOZOIDE-ZONA PELÚCIDA DE OVOCITOS BOVINOS

ANCHORDOQUY JM; ANCHORDOQUY JP; SIRINI, M.A.; TESTA, J.A.; PASCUA AM; FURNUS, C.C.

Córdoba

Simposio; 11 Simposio Internacional de Reproducción Animal; 2015

Instituto de Reproducción Animal de Córdoba

EFECTO DE MINERALES TRAZA SOBRE LA UNIÓN ESPERMATOZOIDE-ZONA PELÚCIDA DE OVOCITOS BOVINOS Anchordoquy JM.,Anchordoquy JP., Sirini MA., Testa JA., Pascua AM., Furnus C. Instituto de Genética Veterinaria Prof. Fernando N. Dulout (IGEVET, CONICET-UNLP),Calle 60 y 118 s/n La Plata, Facultadde CienciasVeterinarias,Universidad Nacional de La Plata E-mail: mateoanchordoquy@fcv.unlp.edu.ar El objetivo fue estudiar el efecto del cobre (Cu), manganeso (Mn) y zinc (Zn) sobre la unión espermatozoide-zona pelúcida (ZP). Los espermatozoides vivos obtenidos a partir de semen congelado de bovino fueron separados mediante un gradiente discontinuo de Percoll. El test de unión a ZP se realizó co-incubando los espermatozoides (concentración final: 1millon/ml) con ovocitos (obtenidos de frigorífico) desnudos e inmaduros (n= 60/tratamiento/experimento, obtenido en 4 réplicas) por 2 hs en medio TALP a 39°C con 5% CO2 en aire. El medio TALP fue suplementado con:Experimento 1:0 (Control), 2, 4 y 6 μg/ml de Cu; Experimento 2:0 (Control); 0,2; 0,4 y 0,6 μg/ml de Mn y Experimento 3: 0 (Control); 0,7; 1,1 y 1,5 μg/ml de Zn. Las concentraciones corresponden al estatus plasmático de deficiencia severa (DS), deficiencia marginal (DM) y adecuado (AD) para cada mineral respectivamente. Además, se evaluó el efecto de la suplementación conjunta de minerales: Experimento 4: 0 (Control); 4 μg/ml de Cu; 0,4μg/ml de Mn; 1,1μg/ml de Zn y 4 μg/ml de Cu + 0,4μg/ml de Mn + 1,1μg/ml de Zn. Luego, los ovocitos fueron lavados y teñidos con Hoechst 33342. El número de espermatozoides unidos a la ZP fue evaluado con microscopio de epifluorescencia. Los datos se analizaron mediante una regresión lineal mixta (SAS 9.0). Se consideró significativa a p ≤ 0,05.La presencia de Cu, Mn o Zn, en concentraciones similares a las encontradas en el plasma debovinos con deficiencia marginal,aumentó el número de espermatozoides unidos a la ZP (Tabla 1). Sin embargo, la presencia conjunta de los tres minerales no presentó diferencia respecto al control (Tabla 2). Tabla1. Efecto de diferentes concentraciones de Cu, Mn y Zn en el medio de FIV sobre el número de espermatozoides unidos a la zona pelúcida. Control DS DM AD Cu 34,5 ± 3,9a 32,2±5,7 a 70,3±5,8 b 44,1±4,0 a Mn 32,4±4,2 a 32,7±5,6 ac 49,5±6,1 b 47,3±5,7bc Zn 9,6±5,9 a 25,4±5,9 b 42,1±5,9 c 16,9±5,9ab (a,b,c)Dentro de cada fila son diferentes (p