El silenciamiento del receptor de mineralocorticoides (MR) del miocardio cancela la segunda fase de fuerza (SFF) post-estiramiento

DÍAZ RG; VILLA-ABRILLE MC; ENNIS IL; MORGAN PE; CINGOLANI HE; PÉREZ NG

Rosario

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2012

El silenciamiento del receptor mineralocorticoides (MR) del miocardio cancela la segunda fase de fuerza (SFF) post-estiramiento. Díaz RG, Villa-Abrille MC, Ennis IL, Morgan PE, Cingolani HE, Pérez NG. Centro de Investigaciones Car­diovasculares, Facultad de Ciencias Médicas de La Plata (UNLP), calle 60 y 120, 1900 La Plata, Argentina. gperez@med.unlp.edu.ar El estiramiento del miocardio provoca un aumento rápido de fuerza contráctil seguido por una fase lenta o SFF que se debe a un aumento del Ca2+ intracelular. Aunque la causa del aumento de Ca2+ se discute, nosotros hemos propuesto que un mecanismo autocrino/paracrino de activación del intercambiador Na+/H+ miocárdico (NHE1) por quinasas redox-sensibles sería clave. Además, usando herramientas farmacológi­cas, hemos propuesto que la activación del MR sería parte de la cadena de eventos disparada por el estiramiento y que conduce a la SFF. Sin em­bargo, la especificidad de los inhibidores farmacológicos del MR spirono­lactona y eplerenona ha sido cuestionada. Más aún, un trabajo reciente en músculo liso ha alertado que estos compuestos pueden afectar rutas de señalización que no dependen de la activación del MR. El objetivo de este trabajo fue testear específicamente el rol del MR en la SFF. Para ello diseñamos un RNA de interferencia capaz de silenciar específicamente al MR y lo incorporamos a un vector lentiviral (l-shMR), el que fue luego inyectado en la pared ventricular izquierda de ratas Wistar. Otro grupo de ratas inyectadas con un vector que expresaba una secuencia no-si­lenciadora (scramble, ?Scr?) del MR sirvió de control. Luego de 1 mes se midió la expresión del MR en ventrículo izquierdo y se evaluó en mús­culos papilares aislados la SFF, así como los cambios post-estiramiento del pHi (por activación del NHE1 en medio libre de bicarbonato) y de la fosforilación de quinasas redox-sensibles (ERK1/2). Los corazones con l-shMR mostraron una reducción significativa de la expresión proteica del MR (100 ± 5.9 % n=8, Scr vs. 57 ± 5.8 % n=9, l-shMR, P<0.05) y cancelación tanto de la SFF (en % del aumento rápido inicial: 125.9 ± 1.8 n=8, Scr, vs. 103.9 ± 1.3 n=8, l-shMR, P<0.05) como del aumento del pHi disparado por el estiramiento (cambio de pHi: 0.156 ± 0.025 n=7, Scr, vs. 0.009 ± 0.015 n=10, l-shMR, P<0.05). Además, el estiramiento produjo un aumento de la fosforilación de ERK1/2 que fue significativamente re­ducido por el l-shMR (en % del control no estirado: 149.6 ± 9.9 n=6, Scr vs. 121.2 ± 5.6 n=7, l-shMR, P<0.05). Los resultados obtenidos proveen evidencia suficiente para proponer que la activación del MR es crucial en el mecanismo autocrino/paracrino disparado por el estiramiento que conduce a la activación del NHE1 y al consecuente desarrollo de la SFF.