ANTIMICROBIAL EFFECT OF A PROTEOLYTIC ENZYME FROM THE FRUITS OF SOLANUM GRANULOSO LEPROSUM (DUNAL) AGAINST HELICOBACTER PYLORI

DIEGO BALADA ; MAURICIO ADARO; ÁNGEL GABRIEL SALINAS IBÁÑEZ; FLORENCIA FERRAMOLA; DIEGO VALLÉS; SONIA BARBERIS ; ALBA VEGA

CABA

Congreso; IV Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina.; 2020

Helicobacter pylori es una bacteria microaerofila, Gram negativa de forma helicoidal que coloniza la mucosa gástrica y el revestimiento epitelial del estómago. Es causante de infecciones crónicas, pudiendo desarrollar gastritis, úlcera péptica, linfomas asociados al tejido de la mucosa linfoide y cáncer gástrico. El tratamiento de la infección incluye el uso de antibióticos e inhibidores de la bomba de protones. El fracaso terapéutico debido a la aparición de cepas resistentes, exige investigar nuevos compuestos contra H. pylori. Solanum granuloso-leprosum (Dunal) es una planta nativa del Sur de Brasil, Paraguay, Uruguay y el Noreste de Argentina. El objetivo del presente trabajo fue estudiar el efecto de un extracto proteolítico parcialmente purificado (granulosaína) obtenido de los frutos de S. granuloso-leprosum sobre la transcripción de genes de virulencia de H. pylori y el efecto adyuvante sobre antibióticos de elección para el tratamiento. Se trabajó con la cepa patrón de H. pylori NCTC 11638 y se evaluó el efecto de granulosaína estableciendo valores de CIM y CBM mediante microdilución en placa según el Instituto de Laboratorios Clínicos de EE.UU (CLSI). A partir de un cultivo planctónico de H. pylori en presencia y ausencia de concentraciones sub inhibitorias (1/2 CIM) de la enzima, se realizó la técnica de RT-PCR para detectar cambios en la transcripción de los genes de virulencia omp18, flaA y ureA con respecto a un gen control (ARNr 16s). En este caso, se realizó una relación de las intensidades de las bandas (gen de virulencia/gen control) en las diferentes condiciones ensayadas (tratadas/no tratadas) utilizando el programa ImageJ. Se evaluó la actividad adyuvante de granulosaína sobre antimicrobianos de elección, por difusión en agar. Los resultados obtenidos para CIM y CBM fueron de 312,5 μg/ml. En presencia de granulosaína la expresión de los genes omp18, flaA, ureA disminuyó significativamente, respecto al gen constitutivo 16S (p < 0.05). El uso combinado de antimicrobianos y granulosaína mostró efecto sinérgico para AML, CLA y LVX; excepto para MTZ. Estos resultados permitirían plantear el uso combinado de granulosaína con antimicrobianos, aumentando la eficacia de tratamientos frente a H. pylori.