Preconcentración en línea y detección fluorescente de vestigios de ácido tolfenámico

MUÑOZ, VANESA; FERNANDEZ, LILIANA; GIL, RAÚL A.; TALIO, MARÍA C.

Santa Rosa, La Pampa

Congreso; X Congreso Argentino de Química Analítica; 2019

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

El ácido tolfenámico, ácido 2 - [(3-cloro-2-metilfenil) amino] benzoico (TOL), derivado del ácido antranílico, es un medicamento antiinflamatorio no esteroideo (AINE), el cual es utilizado en la medicina tanto para seres humanos como en uso veterinario1,2.Desde el punto de vista medioambiental, los productos farmacéuticos, sus metabolitos y productos de degradación en medios acuáticos pueden alterar el equilibrio de los ecosistemas; estos residuos tóxicos han sido identificados incluso en agua potable tratada y agua de mar.Si bien existen varios métodos analíticos para la determinación de TOL, incluyendo titrimétrico, espectrofotométrico, espectrofluorimétrico, muchas veces las sensibilidades instrumentales no resultan adecuadas para las bajas concentraciones del analito. La preconcentración sigue siendo un paso fundamental para lograr resultados de calidad analítica.La metodología propuesta se basa en el efecto de quenching de TOL sobre seroalbúmina bovina (BSA) y utiliza un sistema de inyección en flujo (FI) para la preconcentración en línea de TOL sobre minicolumnas de nanotubos de carbono antes de la detección fluorescente.Debido a que la fluorescencia de TOL es escasa, se realizaron varios ensayos con diferentes fluoróforos (8-hidroxiquinolina, BSA, eosina, rodamina, entre otras) siendo TOL-BSA el sistema que mostró un comportamiento de quenching (λexc 240 nm; λem 380 nm). Se estudiaron y optimizaron los parámetros del sistema (pH, concentración de reactivos, concentración y naturaleza de buffer utilizado y los parámetros que influyen en el análisis FI (naturaleza y concentración del eluyente, velocidad de flujo, volumen de inyección de muestra, entre otros). Para lograr la preconcentración selectiva del analito, se introdujo una mini columna de nanotubos de carbono (CNT). El efecto de quenching sobre la emisión fluorescente de BSA fue descripto por la ecuación de Stern-Volmer3 siendo el valor de la constante obtenida bajo las condiciones óptimas (KSV) de 1,8 x107 L mol-1. Se evidenció una tolerancia adecuada con un LOD de 0,19 µg L-1, un LOQ de 0,58 µg L-1 y una velocidad de muestreo de 30 muestras h-1. La nueva metodología se aplicó con éxito en la determinación de TOL en muestras ambientales enriquecidas con recuperaciones cercanas al 100%.La metodología propuesta se aplicó a la cuantificación de TOL en muestras de agua potable y ambiental. Esta metodología representa una herramienta analítica útil para el monitoreo de TOL en las muestras estudiadas, con elevada sensibilidad, selectividad adecuada y potencial para ser aplicado en laboratorios de control de calidad farmacéutica.1 X. Liu, M. Abdelrahim, A. Abudayyeh, P. Lei, S. Safe, The nonsteroidal anti-inflammatory drug tolfenamic acid inhibits BT474 and SKBR3 breast cancer cell and tumor growth by repressing erbB2 expression, Mol. Cancer Ther., 8 (2009)1207-17.2 P. Sidhu, M. Landoni, F. AliAbadi, P. Lees, Pharmacokinetic and harmacodynamic modelling of marbofloxacin administered alone and in combination with tolfenamic acid in goats, Vet. J., 184 (2010) pp. 219-229.3 J.R. Lakowicz, Principles of Fluorescence Spectroscopy, 3rd ed. Springer, 2006.