Nanopartículas de ZnO integradas en un inmunosensor para la detección temprana de galactomananos en muestras de suero humano

RABA J; PIGUILLEM, SOFÍA V.; MESSINA, GERMÁN A.; MARÍN-BARROSO, E.; FERNÁNDEZ BALDO MA

Santa Rosa, La Pampa

Congreso; X Congreso Argentino de Química Analítica; 2019

Universidad Nacional de La Pampa, Asociación Argentina de Químicos Analíticos

Nanoparticulas de ZnO integradas en un inmunosensor para la detección temprana de galactomananos en muestras de suero humanoPiguillem SV ª, Marin-Barroso E a, Raba J a, Messina GA a, Fernández-Baldo MA ª*. a Instituto de Química San Luis (INQUISAL)-Universidad Nacional de San Luis, San Luis, San Luis, Argentina, 5700. *e-mail: mbaldo@unsl.edu.ar Galactomanano (GMN) es un componente polisacárido de la pared celular de la especie Aspergillus que es liberado durante la invasión tisular. La aspergilosis invasiva (IA) es una infección humana causada por un tipo de moho llamado Aspergillus fumigatus. Este moho a menudo se ha encontrado en hojas muertas, descomponiendo materia vegetal y fertilizante orgánico. La sintomatología de esta enfermedad puede ser inespecífica, puede causar tos, dolor pleurítico, fiebre y generalmente se presenta con derrame pleural. Cuando esta infección va al cerebro, puede causar convulsiones, accidentes cerebrovasculares, meningitis y puede ser fatal 1. GMN es un biomarcador de interés médico porque se encuentra en la sangre de pacientes con IA. El propósito de este trabajo es el desarrollo de un inmunosensor capaz de detectar GMN en etapas tempranas de esta enfermedad. Por lo tanto, las nanopartículas de ZnO (ZnONPs) se sintetizaron, caracterizaron y se utilizaron como plataforma de inmovilización de anticuerpos anti-GMN monoclonales en un inmunosensor fluorescente. La concentración de GMN capturada se detectó luego con fluorescencia inducida por láser (LIF) utilizando un sistema de anticuerpo anti-GMN conjugado con HRP. El HRP catalizó la oxidación de 10-acetil-3,7-dihidrofenoxacina no fluorescente (ADHP) a una resorufina altamente fluorescente, que se midió mediante un detector LIF, utilizando la excitación lambda a 561nm y la emisión a 585nm, en presencia de agua oxigenada. Los límites de detección (LOD) calculados para la detección de LIF y para un kit de prueba de ensayo inmunoabsorbente comercial (ELISA) comercial fueron 0.07 y 1 ng mL-1, respectivamente. Los coeficientes de variación dentro y entre ensayo para el procedimiento de detección de LIF fueron inferiores al 6,3%. Este inmunosensor se puede aplicar al diagnóstico temprano de IA, ya que ofrece varias ventajas atractivas como alta selectividad y sensibilidad debido a la inmovilización de anticuerpos monoclonales en ZnONPs utilizado como nano-plataforma de bioafinidad 2.1 Rizzetto L, Giovannini G, Bromley M, Bowyer P, Romani L, Cavalieri D, PLoS One, 8 (2013), e56651.2 Regiart M, Fernández-Baldo MA, Spotorno VG, Bertolino FA, Raba J, Biosens. Bioelectron, 41 (2013) 211?217.Agradecimientos: Los autores desean agradecer el apoyo financiero de la Universidad Nacional de San Luis (UNSL), el Instituto de Química de San Luis (INQUISAL), y el Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET).