INQUISAL   20936
INSTITUTO DE QUIMICA DE SAN LUIS "DR. ROBERTO ANTONIO OLSINA"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Determinación de la actividad de β-glucosidasa en suelo semiárido mediante un electrodo de láminas impresas modificado.
Autor/es:
PATRICIA W. STEGE; GUILLERMO BIANCHI; ROBERTO A. OLSINA; GERMÁN A. MESSINA; JULIO RABA
Lugar:
Bahía Blanca, Argentina
Reunión:
Congreso; 5to Congreso Argentino de Química Analítica; 2009
Resumen:
<!-- /* Font Definitions */ @font-face {font-family:"Cambria Math"; panose-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:roman; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:-1610611985 1107304683 0 0 159 0;} /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:10.0pt; font-family:"Times New Roman","serif"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:ES; mso-fareast-language:ES;} p.MsoFooter, li.MsoFooter, div.MsoFooter {mso-style-unhide:no; mso-style-link:"Footer Char"; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; tab-stops:center 220.95pt right 441.9pt; font-size:10.0pt; font-family:"Times New Roman","serif"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:ES; mso-fareast-language:ES;} p.MsoBodyTextIndent2, li.MsoBodyTextIndent2, div.MsoBodyTextIndent2 {mso-style-unhide:no; mso-style-link:"Body Text Indent 2 Char"; margin-top:12.0pt; margin-right:0cm; margin-bottom:0cm; margin-left:0cm; margin-bottom:.0001pt; text-align:justify; text-indent:42.55pt; line-height:200%; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; mso-bidi-font-size:10.0pt; font-family:"Times New Roman","serif"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-ansi-language:PT-BR; mso-fareast-language:ES;} span.BodyTextIndent2Char {mso-style-name:"Body Text Indent 2 Char"; mso-style-unhide:no; mso-style-locked:yes; mso-style-link:"Body Text Indent 2"; mso-ansi-font-size:12.0pt; mso-ansi-language:PT-BR; mso-fareast-language:ES;} span.FooterChar {mso-style-name:"Footer Char"; mso-style-unhide:no; mso-style-locked:yes; mso-style-link:Footer; mso-ansi-language:ES; mso-fareast-language:ES;} .MsoChpDefault {mso-style-type:export-only; mso-default-props:yes; font-size:10.0pt; mso-ansi-font-size:10.0pt; mso-bidi-font-size:10.0pt;} @page Section1 {size:21.0cm 842.0pt; margin:70.9pt 70.9pt 70.9pt 70.9pt; mso-header-margin:70.9pt; mso-footer-margin:70.9pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> La hidrólisis completa de la celulosa en el suelo transcurre en distintos episodios, en los que intervienen diferentes enzimas del sistema enzimático celulolítico. Se distinguen tres fases en la degradación de la celulosa: i) transformación de la  celulosa insoluble (cristalina)  en celulosa soluble (amorfa), ii) transformación de celulosa soluble en oligosacáridos y celobiosa (dímero de la glucosa) y iii) transformación de la celobiosa en glucosa. En las dos primeras fases intervienen diversas enzimas que podemos incluir dentro del grupo de las celulasas, mientras que en la tercera está presente una enzima que cataliza la ruptura del enlace beta del disacárido, denominada β-glucosidasa (β-Glu). La intervención de la de esta enzima resulta decisiva para que se produzca la degradación completa de la celulosa. La β-Glu es una enzima producida por las células bacterianas y fúngicas para satisfacer sus necesidades de glucosa. La actividad de esta enzima es especialmente sensible a cambios en el suelo y ha sido propuesta como un indicador temprano de la calidad de los mismos [1], teniendo una estrecha relación con los cambios sufridos por la materia orgánica de los suelos [2]. En el desarrollo de este trabajo de investigación se diseñó un electrodo enzimático modificado con nanotubos de carbono de pared múltiple (MWCNT) para la determinación de la actividad de β-Glu en suelos semiáridos de la provincia de San Luis. Glucosa oxidasa y Peroxidasa del rábano picante (HRP) se inmovilizaron sobre la superficie de un electro de trabajo del electro de láminas impresas (SPCE) modificado con Nafion-MWCNT. Como sustrato enzimático se utilizó el disacárido celobiosa el cual se encuentra naturalmente en suelos. Este disacárido libera dos moléculas de glucosa al ser hidrolizado por la β-Glu, las cuales fueron monitoreadas utilizando el SPCE modificado utilizando catecol (Q) 1 mM como mediador. La HRP en presencia de peróxido de hidrógeno (H2O2) cataliza la oxidación Del mediador. La corriente de reducción generada por la reduccion de Q fue detectada sobre (SPGE) a -150mV. La actividad de β-Glu fue calculada en relación a la liberación de glucosa en µg g-1 h-1. Como conclusión demostramos las posibles aplicaciones de una metodología de una alta eficiencia, bajo costo por análisis en cortos periodos de tiempo con una adecuada sensibilidad para de determinación de la actividad de β-Glu en suelos. Este desarrollo brinda nuevas alternativas para el estudio futuro de diferentes indicadores bioquímicos en suelo.       [1] Ndiaye EL., Sandeno JM., McGrath D., Dick RP., Am. J. Alternative. Agr. 15 (2000) 26. [2] Debosz K., Rasmussen PH., Pedersen AR., Applied Soil Ecol. 13 (1999) 209.