Inmunosensor microfluídico electroquímico que emplea Fe2O3@AuNPs para la cuantificación de IgG anti-Toxocara canis

REGIART D. MATIAS; PEREIRA V. SIRLEY; JOFRE, CLAUDIO F.; ARANDA, PEDRO R.; GERMÁN A. MESSINA; FERNÁNDEZ-BALDO, MARTÍN A.; JULIO RABA

Santa Rosa (La Pampa)

Congreso; 10º Congreso Argentino de Química Analítica; 2019

Asociacion Argentina de Quimica Analitica

La toxocariasis es una enfermedad causada por la ingestión accidental de huevos infecciosos queeclosionan en la primera porción del intestino. Posteriormente, las etapas juveniles se distribuyenpor todo el cuerpo, generando síntomas de manifestaciones de leves a severas. La posibilidad deun diagnóstico temprano es de gran importancia, ya que permite un manejo y tratamiento adecuadosde los pacientes que sufren de toxocariasis1,2.En el presente trabajo se desarrolló un inmunosensor microfluídico para la determinacióncuantitativa de anticuerpos IgG contra Toxocara canis (IgG anti-T). La detección se llevó a caboutilizando un inmunoensayo no competitivo, en el que se inmovilizaron de forma covalente antígenossecretores-excretores de larvas de la segunda etapa (TES) de T. canis sobre nanopartículasbimetálicas core-shell de óxido férrico cubiertas con oro (Fe2O3@AuNPs)3. Estas nanopartículasfueron caracterizadas por microscopía electrónica de barrido (SEM), espectrometría de energíadispersiva (EDS) y voltamperometría cíclica (CV), e incrementan la sensibilidad y selectividad de lametodología4.Los anticuerpos presentes en las muestras de suero reaccionaron inmunológicamente con TES, yluego se cuantificaron utilizando un segundo anticuerpo anti-IgG marcado con enzima peroxidasa(HRP). HRP cataliza la reducción de peróxido de hidrógeno (H2O2) a agua (H2O) con laconsecuente oxidación del mediador catecol (H2Q) a p-benzoquinona (Q). La posterior reducciónelectroquímica de Q a H2Q es detectada sobre la superficie del electrodo de trabajo, el cual fueelaborado por sputtering en el sistema microfluídico. La corriente obtenida como respuesta esdirectamente proporcional a la actividad de la enzima y consecuentemente a la concentración deIgG anti-T presente en la muestra. El tiempo total del ensayo fue de 20 minutos, habiendo realizadola detección electroquímica en menos de 1 minuto. El límite de detección calculado para lametodología propuesta fue de 0.10 ng mL−1 y los coeficientes de variación intra- e inter- ensayofueron menores al 6%. Los resultados muestran la utilidad del inmunosensor desarrollado para ladeterminación rápida de anticuerpos IgG anti-T de perro.