Combinación de large volume sample stacking y dynamic ph junction para la preconcentración on-line de compuestos fenólicos por electroforesis capilar

ACOSTA, GIMENA; ARCE, SILVIA; ORTEGA, CLAUDIA; MARTINEZ, LUIS DANTE; GOMEZ, MARÍA ROXANA

Bahia Blanca

Congreso; V Congreso Argentino de Química Analítica; 2009

La preconcentración on-line de analitos es uno los temas más atractivos en Electroforesis Capilar (CE), ya que permite aumentar la sensibilidad en los análisis, en algunos casos en varios órdenes de magnitud. Con el objetivo de aumentar los límites de detección se desarrolló una metodología de electroforesis capilar de zonas (CZE), combinándose dos diferentes estrategias de preconcentración on-line: sample stacking y dynamic pH junction. Mediante la técnica de large-volume sample stacking, se inyecta hidrodinámicamente un gran plug de muestra de baja conductividad. Cuando los iones alcanzan la interfase que separa las regiones de alto campo eléctrico (zona de muestra), de las regiones de bajo campo eléctrico (zona de background electrolyte, BGE), se acumulan en una zona estrecha produciéndose un fenómeno de preconcentración. Por otro lado, en la técnica dynamic pH junction se logran cambios significativos en las movilidades de los analitos mediante el uso de sistemas de buffers con pHs discontinuos. En el presente trabajo se realizó la separación y preconcentración on-line de siete compuestos fenólicos estructuralmente relacionados comúnmente presentes en plantas medicinales pertenecientes a la familia de las Lamiáceas. Los analitos investigados fueron: 4-hidroxicumarina, 6-hidroxicumarina, 3-acetilcumarina, ác. rosmarínico, ác. cafeico, ác. cinámico, ác. 4-hidroxicinámico y ác. ferúlico. El BGE utilizado consistió en solución de tetraborato de sodio 30 mM, pH 9,2. La muestra se preparó en un buffer tetraborato de sodio 10 mM, pH 6,2 para investigar el efecto de la utilización de sistemas discontinuos dentro del capilar (zonas de muestra y BGE), respecto del pH y de la conductividad. La inyección de la muestra se realizó en el modo hidrodinámico a una presión de 0,5 Psi. Se investigó el efecto del tiempo de inyección sobre la eficiencia de la preconcentración, en un intervalo de 30-90 segundos. Los mejores resultados se obtuvieron con tiempos de inyección de 50 segundos. De acuerdo a nuestros resultados las áreas corregidas incrementaron en un factor de 8,05-10,47 comparadas con las áreas corregidas obtenidas por CZE convencional. El método desarrollado puede ser aplicado a la identificación y cuantificación de compuestos fenólicos comunes en Lamiáceas y a la realización de perfiles químicos característicos. Además permite detectar en forma rápida y confiable la adulteración y/o sustitución de productos medicinales de origen vegetal.