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Introducción: El aluminio (Al) es un tóxico metálico, capaz de interferir en una variedad de procesos celulares y metabólicos del sistema nervioso y otros tejidos del organismo; siendo considerado como una posible causa de osteodistrofia renal, Parkinson y enfermedad de Alzheimer. La presencia de este metal en muestras biológicas de fumadores se encuentra relacionada al empleo de diferentes compuestos de aluminio que se utilizan como aditivos en la elaboración de cigarrillos. En el presente trabajo se propone una nueva metodología para la cuantificación de Al(III) en muestras de orina de 24 h de sujetos fumadores de cigarrillos tradicionales, fumadores pasivos, sujetos con exposición a otras formas de consumo de tabaco, incluyéndose también un grupo control. Resultados: La separación/preconcentración del analito se realizó sobre membranas de Nylon empleando una solución del tensoactivo aniónico SDS y del colorante Quinizarina a pH 5 (buffer acético/acetato), permitiendo su posterior cuantificación mediante fluorescencia en fase sólida (λext = 490 nm, λem = 573 nm). Se estudiaron y optimizaron las variables experimentales que influyen en la eficiencia de la etapa separativa y determinativa. Trabajando en condiciones óptimas, se alcanzaron recuperaciones cuantitativas > 99% con un límite de detección de 10,5 µg L-1 y un intervalo de linealidad de dos órdenes de magnitud. La metodología desarrollada fue satisfactoriamente aplicada a la determinación de Al(III) en muestras de orina de sujetos con diferente grado de adicción al tabaco, evidenciándose mayores concentraciones del metal en el grupo fumadores respecto a los no fumadores.Conclusiones: La mejora lograda tanto en sensibilidad como en selectividad, merced a la etapa de quimiofiltración, convierte a esta nueva metodología en una vía alternativa adecuada para la determinación y monitoreo de Al(III) en muestras biológicas, representando una valiosa contribución en las áreas de la química verde, diagnóstico clínico y control toxicológico. Los contenidos de Al(III) hallados permiten aseverar que la adicción al tabaco constituye una fuente de exposición al tóxico metálico.