Inmunosensor microfluídico basado en nanoplataformas de sílicaquitosano para la detección del biomarcador de cáncer epitelial

PIGUILLEM, S.; GERMÁN A. MESSINA; PEDRO ARANDA; JULIO RABA; VICTORIA MEDAWAR; FERNANDEZ BALDO, MARTIN

Congreso; IX Congreso Argentino de Química Analítica. 7 al 10 de Noviembre 2017. Rio Cuarto, Cordoba ? Argentina; 2017

El receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR, ErbB1, HER1) es una proteína trans-membrana celular situada en la superficie celular, que se activa por unión a sus ligandos específicos y que controla procesos celulares relevantes, incluyendo la adhesión, la migración, la apoptosis, la diferenciación celular y la proliferación [1, 2]. Una sobreexpresión de EGFR se ha informado en varios tipos de carcinomas de origen epitelial, como mama, pulmón, cabeza/cuello, gástrico, colorrectal, renal, próstata, esófago, ovario y pancreático, por lo que la detección precoz de la misma en suero de pacientes se considera de valor diagnóstico [1, 2].En el presente trabajo presentamos un inmunosensor microfluídico con detección electroquímica basado en nanoplataformas de sílica recubiertas por quitosano (CHSiNPs) para la inmovilización de anticuerpos monoclonales anti-EGFR, quienes reaccionan específicamente con la proteína EGFR presente en muestras de suero. Posteriormente, la cantidad de EGFR que reaccionó fue cuantificado por un segundo anticuerpo anti-EGFR marcado con la enzima peroxidasa (HRP), la que, en presencia de peróxido de hidrógeno, cataliza la oxidación de 4-ter-butil-catecol a 4-terbutil-ortoquinona. Esta última es reducida electroquímicamente en la superficie de un electrodo de oro a -0,10 V. La corriente medida es directamente proporcional a la concentración de este biomarcador tumoral presente en la muestra del paciente. Por otra parte, las CHSiNPs fueron caracterizadas por microscopía electrónica de barrido (Fig. 1) y por detección de energía dispersiva (Fig. 2). Los límites de detección para el inmunosensor propuesto y un ELISA comercial que se utilizó para validar nuestro desarrollo fueron de 1,37 pg mL-1 y 1,25 ng mL-1, respectivamente y los coeficientes de variación para los ensayos intra e inter día fueron menores que 5,53%. Finalmente, el inmunosensor desarrollado podría ser una herramienta analítica prometedora para la detección precoz de estos severos tipos de cáncer de origen epitelial.