Aplicación de un cultivo mixto de cepas fúngicas autóctonas en la biotransformación de Cr(VI).

BAZÁN C; VILLEGAS LB; CASTRO MF

Rosario

Congreso; ALAM2016; 2016

ALAM

Los microorganismos se encuentran en la naturaleza conviviendo en consorcios para beneficio mutuo. Por esto, la utilización de cultivos mixtos en procesos de biorremediación de metales pesados surge como una alternativa al uso de cultivos puros. El objetivo de este trabajo fue evaluar tolerancia y capacidad de remoción de cromo de un cultivo mixto de tres cepas fúngicas aisladas de sedimentos del Río Chorrillos, San Luis:Candida sp., Trichoderma sp. y Wickerhamomyces sp. resistentes a Cr(VI). Se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) del cultivo mixto, en 10 ml de medio líquido EG (g L‐1: glucosa, 10; K2HPO4, 0,125; KH2PO4, 0,125; MgSO4, 0,1 y extracto de levadura, 1), con concentraciones crecientes de Cr(VI) (250‐1200 mg L‐1) y un control biótico sin cromo (CB). Se incubaron 106 células o esporos de cada cepa, a30°C y 200 rpm durante 120h y se determinó la viabilidad de los cultivos utilizando resazurina (reactivo redox). La CIM se definió como la menor concentración de Cr(VI) con la que no se observó reducción de la resazurina. Se evaluó crecimiento y remoción de Cr(VI) en 50 ml de medio líquido EG suplementado con Cr(VI) (25‐100 mg L‐1) y en un CB, en idénticas condiciones. Se inoculó 106 células o esporos ml‐1 (concentración final) de levaduras u hongo filamentoso, respectivamente. El crecimiento se evaluó por peso seco, la remoción de Cr(VI) por el método colorimétrico de la 1,5‐Difenilcarbazida cada 24h y cromo total en sobrenadantes y en la biomasa por espectrometría de emisión óptica (BAIRDICP 2070). Los ensayos se realizaron por triplicado. Al final de la incubación se confirmó la presencia de los microorganismos por observacionesmicroscópicas y reconocimiento en placa. La CIM para el cultivo mixto fue de 550 mg L‐1de Cr(VI), intermedio a los obtenidos con Candida sp.(1500 mg L‐1), Wickerhamomyces sp.(250 mg L‐1) y Trichoderma sp. (1000 mg L‐1) en cultivos puros. El crecimiento del cultivo mixto en presencia del metal disminuyó en un 40‐50% respecto al CB. La remoción de Cr(VI) con 25 y 50 mg L‐1 de Cr(VI) fue de 90%±0,07 y 80%±0,27 respectivamente, superiores a los obtenidos en cultivos puros; mientras que con 75 y 100 mg L‐1 de Cr(VI) se alcanzó un 50%±1,7 y 33%± 1,1 respectivamente, levemente inferiores a los cultivos puros. Cabe destacar que los valores mas altos de remoción se alcanzaron a tiempos menores en relación a los cultivos puros. La remoción de cromo total fue solo de un 7 a 8 % independientemente de la concentración de cromo en el medio. Al verificar el cultivo mixto a las 120 h, se observó que el Cr(VI) inhibió el crecimiento de Trichoderma sp., por lo que la remoción de cromo fue realizada por las levaduras. Este cultivo mixto mostró resultados interesantes y se espera mejorar la remoción de Cr(VI) optimizando el medio de cultivo y las condiciones de crecimiento, como también evaluar metabolitos de cooperación presentes entre laslevaduras y causantes de la inhibición del hongo filamentoso.