Nuevas estrategias diagnosticas para la detección temprana y sensible de C. trachomatis.

ROMINA LÓPEZ; LORENA L. SOMBRA; PATRICIA W. STEGE

Rosario

Congreso; 8º Congreso Bioquímino; 2016

Actualmente, la infección genital por C. trachomatis es considerada una de las causas más frecuentes de infecciones transmisibles sexualmente (ITS).Esta patología representa un importante problema de salud pública mundialmente, dada su creciente prevalencia, ya que las complicaciones en la enfermedad pueden llevar a la infertilidad.La rápida determinación en laboratorios de análisis clínicos resulta esencial para la pronta aplicación de una terapia exitosa. La detección e identificación de esta bacteria no ha sido fácil de realizar, debido a la necesidad de disponer de instalaciones de bioseguridad para el aislamiento mediante cultivo celular y a los problemas relacionados con las reacciones cruzadas en pruebas serológicas.En el presente trabajo proponemos el desarrollo de un diagnóstico rápido y sensible, mediante la utilización de nano-diamantes (NDs) y electroforesis capilar (EC). El análisis se realiza con muestras de muestras de exudado vaginal. A partir del hisopo se practica una extracción con azida sódica, seguido de sonicado y centrifugado. Luego de retirar y descartar el sobrenadante, se retoma el precipitado con buffer fosfato pH 7,4. Posteriormente realizamos la incubación de la muestra con el bio-conjugado, compuesto de NDs unidos a anticuerpos (Ac) anti MOMP (proteína principal de membrana) a 37 °C durante 15 min. Una vez transcurrido el tiempo de reacción antígeno-anticuerpo se procede a la inyección de la muestra en el equipo de EC (Beckman P/ACE MDQ).La detección se realizó a λ= 200 nm. La presencia de un pico Ag-Ac-NDs delata la positividad en la muestra analizada. Como resultados preliminares hemos podido identificar los picos correspondientes al NDs, al Ac y NDs-Ac. La identificación de picos positivos utilizando anticuerpos anti-MOMP, nos permitirá realizar un diagnóstico sensible y especifico evitando el informe de falsos negativos y falsos positivos, lo que representaría un importante avance en el diagnóstico de C. trachomatis.