INQUISAL   20936
INSTITUTO DE QUIMICA DE SAN LUIS "DR. ROBERTO ANTONIO OLSINA"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Desarrollo de un inmunosensor microfluídico acoplado a una plataforma
Autor/es:
SCALA BENUZZI MARÍA LUZ; PEREIRA SIRLEY; MARIN BARROSO EVELYN; DE VITO IRMA E.; RABA JULIO; MESSINA GERMÁN
Lugar:
La Plata
Reunión:
Congreso; VIII Congreso Argentino de Química Analítica; 2015
Institución organizadora:
AAQA
Resumen:
El objetivo de este trabajo fue desarrollar un inmunosensor microfluídico para la cuantificación de Tripsina inmunoreactiva (TIR), biomarcador para el screening neonatal de Fibrosis Quística (FQ). FQ es una enfermedad autosómica recesiva [1] caracterizada por ser una patología multiorgánica que afecta principalmente los pulmones, el páncreas y las glándulas sudoríparas. Debido a que hasta el momento no tiene cura [2], es esencial un diagnóstico y tratamiento temprano.Con el propósito de realizar la detección de TIR, se desarrolló un inmunosensor microfluídico acoplado a detección electroquímica. Para incrementar la sensibilidad del dispositivo se emplearon dos estrategias [3]: se inmovilizaron anticuerpos anti-TIR en la superficie de nanopartículas magnéticas incorporadas en el canal central del sensor; y por otro lado, la superficie del electrodo de oro fue modificada mediante electrodeposición de nanopartículas de cobre. Para llevar a cabo la detección, se realizó la extracción de TIR de manchas de sangre entera sobre papel de filtro mediante ultrasonido y luego el eluido se inyectó al canal central del dispositivo. Los anticuerpos inmovilizados reaccionaron específicamente con TIR presente en las muestras. Luego, el antígeno unido fue cuantificado utilizando un segundo anticuerpo marcado con la enzima peroxidasa de rábano picante (HRP) y catecol (Q) como mediador electroquímico. HRP en presencia de peróxido de hidrógeno cataliza la oxidación de Q a o-benzoquinona, cuya reducción a Q fue detectada sobre la superficie del electrodo a -0,15 V. La respuesta electroquímica del producto enzimático fue proporcional a la concentración de TIR. Para el ensayo se obtuvieron coeficientes de variación intra e inter-ensayo menores a 4.98% y 6.35%, respectivamente. Los límites de detección para el método propuesto y el ELISA comercial fueron 1,1 ng mL-1y 4.2 ng mL-1, respectivamente, obteniéndose una correlación entre ambos métodos cercana a 1.