Nuevo método para la determinación de perfiles elementales por ICP-MS en fracciones proteicas de líquido sinovial.

MOYANO MF, MARIÑO REPIZO L, ACOSTA M, MARTINEZ LD, GIL RA.

Congreso; VIII Congreso Argentino de Química Analítica. Asociación Argentina de Químicos Analíticos (AAQA).; 2015

Los oligoelementos actúan como cofactores enzimáticos en el organismo y se encuentran a nivelde trazas, la deficiencia de estos se vincula con ciertas patologías [1]. Algunos estudios hanestimado el rol de los oligoelementos en la etiología y patogénesis de la artritis reumatoide (AR),analizando concentraciones de elementos en el líquido sinovial (LS) de pacientes con AR [1]. Poresto, la identificación y detección de metaloenzimas (ej: ceruloplasmina) presenta un marcadointerés en la actualidad2. La determinación elemental de trazas en fluidos corporales es un protocoloampliamente utilizado. Actualmente la medición mediante plasma acoplado inductivamente condetección de masas (ICPMS) se destaca por sus numerosas ventajas [1,3].El objetivo del presente trabajo fue desarrollar un método preciso, sensible y robusto para ladeterminación de perfiles elementales por ICPMS en fracciones proteicas de líquido sinovialhumano separadas por electroforesis. Se realizó la separación proteica con electroforesis en gel depoliacrilamida no desnaturalizante, Native-Page (NPAGE). Las fracciones obtenidas fuerondisueltas, diluidas y posteriormente analizadas por ICPMS. El procedimiento de análisis elementalfue efectivo, basado en evitar la inestabilidad del plasma y minimizar los inconvenientes delinstrumental de ICPMS. NPAGE permitió la separación de proteínas sin la disociación de loselementos unidos a fracciones [2]. La exactitud del método propuesto fue verificada analizandomuestras enriquecidas, así como también, comparando los resultados con muestras tratadas en formaconvencional mediante digestión ácida con microondas. Con el uso combinado de ambas técnicas(NPAGE/ICPMS), se lograron definir perfiles elementales y su distribución bioquímica en LS.El método desarrollado cuenta con la elevada sensibilidad propia del análisis por ICPMS y lasventajas de la separación electroforética de N-PAGE: mínimo volumen de muestra, bajo costo, altorendimiento, y eficiente separación. La información obtenida es potencialmente importante paradilucidar el rol que los oligoelementos tienen en la fisiopatología de la enfermedad.