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Actualmente se ha revalorado la importancia de la leche materna (LM) como forma dealimentación de recién nacidos y lactantes. La LM contiene una variedad de proteínas muchas delascuales requieren un ion metálico para realizar sus funciones biológicas, además hay un ampliointervalo de concentraciones de metales ligados a proteínas de LM [1-3]. El objetivo del presentetrabajo fue desarrollar una metodología robusta y sensible para la determinación de Ti, V, Mn, Co yCu por ICP-MS en fracciones proteicas de LM separadas por electroforesis nativa engel depoliacrilamida (N-PAGE).Las muestras fueron colectadas en tubos libres de metal, posteriormente fueroncentrifugadasbajo refrigeración, para extraer la capa lipídica. La muestra desnatada fue sembrada engeles de poliacrilamida (7,5%), y luego de la separación se obtuvieron 8 fracciones proteicas. Cadafracción fue cortada, colocada en tubos libres de metales y digerida con una mezcla de ácido nítricoy peróxido de hidrógeno. La solución resultante fue diluida con agua Mili-Q y posteriormente seanalizó por ICP-MS.Los resultados mostraron niveles detectables de los metales analizados en todas las fraccionesanalizadas, excepto las fracciones 6 y 7.La fracción 1 exhibió los menores niveles de metalesunidos, la fracción 5 presentó los mayores niveles y la fracción 4 la mayor diversidad de metales(Mn, Co, y Ti).Los LoD obtenidos se encontraron entre3,37ng g-1(V) a 0,635 μg g-1 (Cu), mientrasque los LoQ estuvieron comprendidos entre 11,2 ng g-1 (V) a 2,12μgg-1 (Cu). El RSD% fue < a6,4% (Co).La metodología desarrollada representa una novedosa herramienta que combina lasimplicidad de la separación por PAGE con la sensibilidad, robustez y análisis multielemental delICP-MS, permitiendo utilizar calibraciones acuosas al analizar una muestra con una matrizanalíticamente compleja.