DESARROLLO DE UNA METODOLOGÍA DE ANÁLISIS MULTIANALITO PARA EL MONITOREO DE LA DROGA ANTICHAGÁSICA BENZNIDAZOL Y SUS METABOLITOS EN MUESTRAS DE SANGRE MEDIANTE UPLC-MS/MS

NOELIA A. MARTINEZ; MARSON M. E.; GARCÍA BOURNISSEN F.; ALTCHEH J.; RABA J.; CERUTTI S.

La Plata

Congreso; 8° Congreso Argentino de Química Analítica; 2015

El Mal de Chagas es una enfermedad parasitaria endémica de importancia primaria para nuestra región [1]. Para su tratamiento, los únicos fármacos que se utilizan son benznidazol (BNZ) y nifurtimox [2]. Sin embargo, existen escasos protocolos estandarizados y/o validados para determinar niveles de los antichagásicos en sangre y no se han informado metodologías para cuantificar sus metabolitos. En el caso de BNZ, se han reportado hasta el momento los metabolitos aminobenznidazol (NBNZ) y N-bencilacetamida (BAA) [3]. Resulta entonces de gran importancia el desarrollo de metodologías analíticas para el monitoreo simultáneo de BNZ, NBNZ y BAA en muestras biológicas. La gota de sangre seca sobre papel de filtro como método de muestreo para el bioanálisis cuantitativo permite la reducción del volumen de muestra, simplificando su recolección, procesamiento y envío, así como los costos de almacenamiento.El presente trabajo propone una metodología novedosa basada en la extracción de BZN, BAA y NBNZ con H2O:MeOH (70:30) en muestras de sangre seca, depositadas sobre papel de filtro, previo a su inyección al sistema cromatográfico de alta resolución (UPLC) y detección/cuantificación por espectrometría de masa en tándem (MS/MS). La separación cromatográfica se realizó en una columna C18, empleando elución en gradiente, con los siguientes tiempos de retención de 3,68, 3,58 y 3,62 minutos para BZN, BAA y NBNZ; respectivamente. Se evaluó el efecto de la matriz biológica sobre la ionización de los analitos y no se observó influencia de la señal. La metodología fue validada a través de estudios de recuperación. Fueron obtenidos límites de detección de unos pocos μg L-1. La metodología propuesta aporta una herramienta sensible, selectiva, sencilla y confiable para la detección cuantitativa de BZN y sus metabolitos en muestras de sangre que, aplicada de manera sistemática en muestras de pacientes, generaría información valiosa para un tratamiento racional de la enfermedad.Referencias[1] WHO Expert Committee on the Control of Chagas Disease & World Health Organization, 2005. World Health Organization, Geneva.[2] Garcia-Bournissen F., Altcheh J., Giglio N., Mastrantonio G., Della Vedova C.O., Koren G. (2009). Paediatr. Drugs, 11, 33-37.[3] Marson M.E., Altcheh J., Moscatelli G., Moroni S., García-Bournissen F., Mastrantonio G.E. (2014). Europ. J Drug Metab. & Pharmacokinet., DOI: 10.1007/s13318-014-0195-8