Desarrollo de una técnica espectrofluorimétrica para la determinación sensible de anabasina, un alcaloide de Nicotiana glauca ?palán ? palán?

DEMARIA, CARLA; FERNANDEZ, LILIANA; CHIEN CHUN WANG; GOMEZ, MARÍA ROXANA

Cordoba

Congreso; VI Congreso Iberoamericano de Ciencias Farmacéuticas (COIFFA); 2015

IntroducciónNicotiana glauca Graham (Solanaceae) ``Palán- Palán´´, es utilizada popularmente en forma tópica como madurativa, para la curación de llagas, lastimaduras y quemaduras, como antirreumático y antiartrítico. Sin embargo, esta especie se encuentra en el listado negativo de plantas tóxicas, establecido por ANMAT.Anabasina, el alcaloide predominante en la especie, tiene propiedades teratogénicas y tóxicas (DL50 22 mg/kg) lo que explica los casos fatales producidos por su consumo accidental. Este compuesto se encuentra también en Nicotiana tabacum ``Tabaco´´, y se considera que actúa sinérgicamente con el resto de sus alcaloides en generar el hábito de fumar.Debido a que presenta alta toxicidad a muy bajas concentraciones debe prestarse atención en evitar su presencia en fitoterápicos. Con el objetivo de desarrollar un método rápido, sencillo y de mayor sensibilidad que los existentes, se planteó el análisis de anabasina por medio de una técnica espectrofluorimétrica.ExperimentalEn esta determinación se empleó un espectrofluorómetro Shimadzu RF-5301 con lámpara de Xenón y una celda de cuarzo con un camino óptico de 1 cm. La determinación fluorescente se llevó a cabo a λem= 345 nm y usando λex= 300 nm, slit width exc-em: 5-10. Para la optimización de la presente metodología, se estudiaron variables experimentales tales como pH, naturaleza y concentración del buffer. Para ello, se preparó una solución madre de anabasina en metanol (1,5 mg/mL) a partir de la cual se obtuvieron las soluciones de trabajo mediante adecuada dilución. Los sistemas buffer estudiados fueron citrato de sodio y borato de sodio, ajustando el valor de pH con soluciones de HCl(d) y NaOH(d).Una vez optimizadas las condiciones de trabajo, se procedió a la construcción de la curva de calibración empleando 5 diluciones medidas en un rango de concentración de 9,375 x 〖10〗^(-5) mg/mL a 3,375 x 〖10〗^(-3) mg/mL.ResultadosSe estableció como condición experimental óptima para la determinación de Anabasina en medio acuoso, el uso de solución buffer de citrato de sodio (0,003 N), pH 3,0. El método es lineal en el rango de concentraciones de trabajo obteniendo un R² = 0,9981, siendo la ecuación de la recta y = 250572x + 9,263. La sensibilidad inherente a la técnica permite la cuantificación de anabasina en bajas concentraciones en comparación con el sistema de detección de elección, la espectroscopía UV ? Vis.La metodología desarrollada puede aplicarse al control de la presencia de N. glauca en productos fitoterápicos. Asimismo, también permite la detección del alcaloide anabasina como marcador de tabaco en fluidos biológicos. La utilización de la espectrofluorimetría para la determinación del alcaloide bajo estudio constituye una alternativa económica, rápida y de sencilla aplicación.