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El impacto que la contaminación del medio ambiente, el control de calidad del agua, medicamentos y productos alimentarios tienen sobre la salud humana hace necesario el desarrollo de nuevas metodologías analíticas que permitan estudiar y resolver los problemas que en estas áreas se plantean. Así, la exposición a metales produce en el organismo diversas alteraciones, entre ellas se destaca la síntesis de proteínas, debido a que la mayoría de los metales deprime, altera, modifica o induce la expresión de una o varias proteínas. Además, diferentes técnicas se han utilizado para la separación y análisis de las fracciones proteicas del suero, tal como la electroforesis sobre distintos soportes (membranas de acetato de celulosa, poliacrilamida), entre otras. Por otro lado, pocos elementos químicos presentes en la naturaleza tienen un rol metabólico dentro del organismo. De acuerdo a la proporción que estos ocupan en relación al peso corporal se clasifican en macroelementos, microelementos y elementos trazas (93%, 5% y alrededor del 1% del peso corporal, respectivamente). En particular, selenio (Se) es un elemento traza esencial para animales y humanos. Su deficiencia o disminución en la dieta en adición con otros factores de estrés pueden desencadenar numerosos cambios patológicos. Numerosos estudios previos han demostrado que más del 80% del selenio del organismo se encuentra unido a proteínas, por ende los beneficios de este elemento se deben a las numerosas funciones de la seleno-proteínas. Particularmente, nuestro objetivo fue desarrollar un método novedoso, simple, y preciso para la determinación de Se mediante absorción atómica con atomización electrotérmica (ETAAS) en fracciones proteicas de suero separadas por electroforesis sobre membranas de acetato de celulosa (EAC). Durante la separación electroforética se sembraron 4 microlitros de suero de voluntarios sanos (los cuales firmaron el correspondiente Consentimiento Informado) sobre membranas de acetato de celulosa, utilizándose como buffer de corrida al Veronal/Veronal sódico de pH = 8,6. Se utilizó una diferencia de potencial de 200mV por membrana durante un tiempo de 60 min. Una vez concluida la corrida, las membranas se colorearon con Amido 10B durante 5 min y luego fueron decoloradas con una solución decolorante que contenía metanol, ácido acético y agua. De este modo fueron obtenidas las siguientes cinco fracciones proteicas del suero: albúmina, alpha 1 globulinas, alpha 2 globulinas, beta globulinas, y gamma globulinas. Cada una de estas fracciones fueron cortadas y colocadas en tubos libres de metales hasta su análisis. Adicionalmente, una porción de la membrana de acetato de celulosa sin fracciones proteicas fue cortada y colocada en tubos libres de metales. Esta última fue utilizada como blanco. La disolución de las porciones de membrana se realizó con ácido acético al 80%. Posteriormente se optimizó el agregado de una solución de níquel como modificador químico y las temperaturas de pirolisis y atomización. En condiciones óptimas se utilizó una solución de Ni de 1000ppm, la pirolisis se realizó a 1500ºC y la atomización a 2100ºC. Adicionalmente se utilizó un horno de grafito con plataforma para mejorar la sensibilidad del método. En estas condiciones los resultados alcanzados fueron los siguientes: Tabla 1: Niveles de selenio en fracciones proteicas de suero (µg L-1). Albúmina Alpha 1 Alpha 2 Beta Gamma ND 284,09 ± 15,31 ND 130,21 ± 29,41 ND Los valores corresponden a la media ± SEM. Nuestros resultados nos permiten concluir: El método desarrollado combina la simplicidad y bajo costo de la electroforesis sobre membranas de acetato de celulosa con la elevada sensibilidad de la determinación de trazas de Se por ETAAS. A pesar de complejidad de la matriz, este método permite utilizar patrones acuosos sin que existan efectos de matriz luego de la optimización. Además, este método puede ser utilizado para el monitoreo de Se en suero.