Nuevo método para la determinación de perfiles elementales por ICP-MS en fracciones proteicas obtenidas mediante Native-PAGE de líquido sinovial con artritis reumatoidea.

MOYANO, MARIO FRANCO; MARIÑO REPIZO, LEONARDO; ACOSTA, MARIANO; GIL, RAÚL ANDRES; MARTINEZ, LUIS DANTE

Córdoba

Congreso; II Congreso Argentino de Espectrometría de Masa; 2014

Sociedad Argentina de Espectrometría de Masa

En los últimos años, un gran número de estudios han investigado el posible papel de oligoelementos en la etiología y patogénesis de la artritis reumatoide (AR)1. Como se ve en la literatura, las alteraciones en las concentraciones de elementos en el líquido sinovial de pacientes con AR son inconsistentes y, hasta donde sabemos, no hay informes disponibles de perfiles de metaloproteinas en estos pacientes. Por lo dicho anteriormente, la identificación y detección de metaloproteínas tiene un gran interés, ya que al conocer el perfil elemental unido a proteína permitiría entender muchos procesos biológicos que implican la presencia de un o más elementos. Algunos oligoelementos actúan como cofactores de enzimas en el organismo y, a pesar de que se encuentran a nivel de trazas en el cuerpo, las deficiencias de ellos podrían causar problemas graves. Se encuentran dos tipos generales de anormalidad asociados con deficientes niveles de oligoelementos: uno es el resultado de una carencia en la dieta alimentaria y el segundo es anormalidad relacionada con procesos patológicos variados2; 3. La determinación elemental de trazas en fluidos corporales es un protocolo ampliamente utilizado. Espectrometría de absorción atómica (AAS) es la técnica analítica dominante para análisis elemental. Sin embargo, hoy en día es notoria la transición a la técnica basada en plasma acoplado inductivamente con detección de masas (ICP-MS)4. ICP-MS tiene algunas ventajas, incluyendo la capacidad de medición simultánea de varios elementos con límites de detección muy bajos. Esta técnica es adecuada para estudios de monitoreo a nivel biológico5; 6. Electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE) combinada con métodos instrumentales de análisis elemental (ejemplo: ICP-MS), resulta muy útil para investigar la distribución de los iones metálicos en diversas muestras biológicas. Aquí presentamos un método novedoso (Native Page ? ICP/MS) de alta sensibilidad, empleo de pequeño volumen de muestra y una eficiente separación proteica. La técnica Native Page es de bajo costo, robusta, alto rendimiento y mínimo mantenimiento. Native Page permitió la separación de proteínas sin la disociación de los iones metálicos unidos a fracciones proteicas. El uso combinado de ambas técnicas (Native Page ? ICP/MS) logro con éxito definir perfiles elementales y su distribución bioquímica en líquido sinovial, permitiendo obtener una información potencialmente importante para la comprensión de la fisiopatología presente en AR.