EVALUACIÓN DEL EFECTO DE MATRIZ SOBRE CARNITINA Y ACETILCARNITINA EN MUESTRAS DE SUERO Y ORINA HUMANAS MEDIANTE UHPLC-ESI-MS/MS

ANDREA C. ISAGUIRRE ALICIA LAPIERRE ROBERTO OLSINA SOLEDAD CERUTTI

Mendoza

Congreso; 7° Congreso Argentino de Química Analítica; 2013

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

Carnitina es un metabolito endógeno presente en la mayoría de los mamíferos, entre algunas de las funciones biológicas de este compuesto se encuentra la disminución de formación de radicales libres en distintos tejidos, el mantenimiento de la concentración celular de coenzima A libre (CoA), la eliminación de compuestos potencialmente tóxicos y el transporte de ácidos grasos de cadena larga hacia el interior de la mitocondria para su posterior β-oxidación y producción de energía celular. El metabolismo de carnitina se encuentra íntimamente ligado a una gran variedad de trastornos metabólicos, lo cual da lugar a una redistribución de la misma y de sus acilcarnitinas derivadas. En consecuencia, el monitoreo de los niveles de estos compuestos en fluidos biológicos constituye una herramienta poderosa para estudios clínicos de diagnóstico. Sin embargo, debido a la complejidad de matrices tales como suero y orina, la cuantificación precisa de los compuestos mencionados representa una tarea difícil. Aún, empleándose diversas estrategias de limpieza de muestra y compensación del efecto de matriz, la evaluación del mismo sobre las etapas de análisis de separación/ionización en el caso de espectrometría de masa es de gran importancia. En este contexto, en el presente trabajo se desarrolló una metodología de determinación sensible, robusta y precisa de carnitina y acetilcarnitina en muestras de suero y orina humanos mediante cromatografía líquida de ultra alta presión (UHPLC) asociada a espectrometría de masa en tándem. Nuestros estudios se basaron en evaluar, cuantificar y minimizar el efecto de matriz causado por la composición de las muestras biológicas. A partir de los resultados obtenidos, se observó una disminución de la señal de ambos analitos en aproximadamente un 5% y 50% para suero y orina; respectivamente. Como consecuencia de ello, su cuantificación se llevó a cabo empleándose el método de adición estándar. Esta es la primera vez que se reportan estudios de esta naturaleza para los compuestos y muestras mencionados.