Llenado parcial en electroforesis capilar como herramienta para la determinación de las contantes de asociación entre lipoproteínas y diferentes componentes de la intima

PATRICIA W. STEGE; GERALDINE CILPA; GEBRENEGUS YOHANNES; JULIO RABA; MARJA-LIISA RIEKKOLA

Santa Fé

Congreso; 6to Congreso Argentino de Química Analítica; 2011

AAQA

La arteriosclerosis es una enfermedad producida por el depósito de placas de ateroma en las paredes de los vasos sanguíneos, impidiendo el paso normal de oxígeno y nutrientes a las diversas zonas del cuerpo humano. En el desarrollo de la misma intervienen las lipoproteínas, especialmente LDL (del inglés, low density lipoprotein) y ciertos complejos moleculares en los que participan tanto azucares con proteínas. Estos complejos llamados proteoglicanos tienen una función esencial en la identificación selectiva de las diferentes lipoproteínas. Dado que no existe tratamiento enfocado específicamente a esta enfermedad, ya que la mayoría de los tratamientos actúan sobre la sintomatología, es esencial llegar a conocer los factores desencadenantes del proceso de formación de las placas ateromatosas. En este trabajo desarrollamos una metodología que intenta mimetizar el ambiente en el que se desarrollan las placas y de esta manera estudiar el nivel de interacción entre las lipoproteínas y los diferentes componentes de la intima (glicosaminoglicanos y proteoglicano). Las moléculas seleccionadas fueron dos péptidos claves, p15 y p19, pertenecientes a ApoE (HDL) y ApoB100 (LDL). También se estudio la participación de HDL con y sin ApoE, LDL y VLDL. Se hizo interaccionar a cada una de ellas con moléculas claves que forman parte de la intima: C6S (Condroitin 6 sulfato), C4S (Condroitin 4 sulfato), Heparina y Decorin. La metodología analítica utilizada fue la electroforesis capilar de afinidad en la cual se utilizó la inyección por llenado parcial de las diferentes moléculas para favorecer la interacción de las mismas dentro del capilar. Mediante esta metodología se determinaron las diferentes contantes de afinidad para cada caso utilizando la formula desarrollada por Wang et al [1]. Los valores obtenidos fueron relacionados con los encontrados en bibliografía. Aunque en algunos casos esto no fue posible debido a que es la primera vez que se estudias. Sin embargo se los analizaron desde un punto de vista bioquímico para determinar su coherencia. Por último pudimos confirmar que la electroforesis capilar no sólo es una técnica útil en cuanto a la separación de diferentes moléculas sino que también ha demostrado ser una herramienta poderosa para la determinación de las constantes de asociación.