Determinación de la actividad enzimática de fosfolipasa A2 sobre lipoproteína de baja densidad en presencia y ausencia de albumina utilizando electroforesis capilar

PATRICA W. STEGE; JOANNA WITOS; JULIO RABA; KATARIINA ÖÖRNI; PETRI KOVANEN; MARJA-LIISA RIEKKOLA

Santa Fé

Congreso; 6to Congreso Argentino de Química Analítica; 2011

Asociación Argentina de Química Analítica

La Aterosclerosis es un proceso muy complejo que se inicia con la oxidación de las lipoproteínas de baja densidad (LDL) en la íntima, esto desencadena un proceso inflamatorio/proliferativo en el que intervienen distintas células; linfocitos, monocitos/macrófagos, células musculares lisas y células endoteliales. Entre los enzimas encargados de modificar las LDL está la fosfolipasa A2 secretada de tipo IIA (sPLA2). Este enzima, se ha detectado en placas de ateroma, se encuentra circulante en altos niveles en pacientes con enfermedad cardiovascular (ECV) y, puede ser un marcador de riesgo vascular. En este trabajo se desarrollo un sistema para de determinación de la actividad enzimática on capillary de sPLA2 sobre LDL en presencia y en ausencia de albumina. Albumina es una proteína de transporte capaz de remover, a partir de las LDL oxidadas por la acción de sPLA2, los ácidos grasos y la lisofosfatidilcolina. Este procedimiento on capillary se realizó por llenado parcial en los extremos del capilar para lograr la interacción de la enzima y LDL en presencia y ausencia de albumina. Una vez que las biomoléculas interaccionaron se determino la concentración de los productos los cuales variaron de acuerdo a la presencia o ausencia de albumina. En el caso en el que no se introdujo albumina al sistema el producto cuantificado fue LDL(-) u oxidada y en el caso en que albumina formó parte del sistema los productos estudiados fueron albumina-ácidos grasos y albumina-lisofosfatidilcolina. Para ambos casos podemos decir que la técnica utilizada fue exitosa por lo tanto pudimos demostrar que la electroforesis capilar no solo es una técnica muy útil a la hora de la separación y cuantificación sino también para el estudio de la interacción entre biomoléculas.