Micro-HPLC aplicado al monitoreo de coenzima Q10 en patología mitocondrial

FLOR S.,; CONTIN M.,; MARTINEFSKI M.,; SCIOSCIA S.,; NARO V.,; LUCANGIOLI S.,; TRIPODI V.

Buenos Aires, Argentina

Congreso; 68 º Congreso Argentino de Bioquimica; 2009

Asociacion Bioquimica Argentina

La Coenzima Q10 (2,3-dimetoxi-5-metil-6-decaprenil-1,4-benzoquinona), (CoQ10) es una molécula lipofílica ubicada en la membrana interna de la mitocondria que interviene en la cadena respiratoria controlando la eficiencia de la fosforilación oxidativa y siendo esencial para la producción celular de energía. Asimismo, es considerada un potente antioxidante y participa en la protección de las liproproteínas circulantes contra el daño oxidativo por lo que la determinación de su concentración plasmática resulta de utilidad como marcador del estrés oxidativo y la defensa antioxidante. Asimismo, la deficiencia primaria está asociada a la patología mitocondrial así como a otras patologías que incluyen Alzheimer y Parkinson. La deficiencia primaria es considerada la única patología mitocondrial tratable puesto que los pacientes responden a la suplementación oral con CoQ10. Por lo tanto, su determinación plasmática es importante no solo para el diagnóstico, sino también para el seguimiento post suplementación. Si bien existen numerosos métodos de determinación de CoQ10, los mismos resultan complejos tanto en la preparación de muestra como en el manejo instrumental, lo que dificulta su uso en laboratorios de rutina. Debido a ello, desarrollamos un método analítico por micro HPLC con detección UV utilizando columnas de C18 con partículas híbridas, que permite la cuantificación de la CoQ10 en plasma. La preparación de muestra consistió en una simple extracción líquido- líquido y reconstitución en fase móvil. El método fue aplicado a sujetos normales obteniendo resultados dentro de los valores de referencia (0.8 – 2.0 µg/ml) y en pacientes con patología mitocondrial suplementados con CoQ10 obteniéndose resultados entre 2.3 y 7.0 µg/ml. El método analítico por micro-HPLC desarrollado es rápido, simple, altamente sensible y confiable con las ventajas de utilizar poca cantidad de muestra y bajo consumo de solventes, resultando adecuado para el monitoreo de CoQ10 en pacientes con patologías mitocondriales y aplicable al laboratorio de rutina.