DETERMINACION SIMULTANEA DE ACIDOS BillARES EN SUERO POR CROMATOGRAFIA MICELAR ELECTROCINETICA MODIFICADA CON CICLODEXTRINAS

TRIPODI V.,; SCIOSCIA S.,; LUCANGIOLI S.,; CARDUCCI C.

ROSARIO, ARGENTINA

Jornada; I JORNADAS NACIONALES DE LA ASOCIACION ARGENTINA DE QUIMICOS ANALITICOS; 2001

ASOCIACION ARGENTINA DE QUIMICOS ANALITICOS

La importancia de la función de los ácidos biliares (AS) asociados a los mecanismos fisiológicos y fisiopatológicos en enfermedades hepáticas y hepatobiliares es ampliamente reconocida. Hasta el presente los métodos cromatográficos como GC y HPLC han sido los utilizados para la determinación de AS en matrices biológicas. Sin embargo, la electroforesis capilar (CE) se ha convertido, por sus destacadas características de performance como son su alta resolución y eficiencia en cortos tiempos de análisis, en un método alternativo a los ya convencionales. El objetivo de este estudio fue desarrollar, optimizar y validar un método por CE a fin de obtener la completa resolución y cuantificación simultánea de 15 AS, en sus formas libres (ácido cólico, CA; ácido ursodesoxicólico, UOCA; ácido quenodesoxicólico, COCA; ácido desoxicólico, DCA y ácido litocólico, LCA) y glico y tauro derivados. El electrolito de corrida consistió en un buffer de borato 10mM - fosfato 10mM conteniendo como agente micelar, 50mM de SOS, una mezcla de 13- CD e hidroxipropil 13- CO y 10% de acetonitrilo. Varios parámetros fueron optimizados tales como pH del buffer, voltaje, temperatura y concentración de aditivos. Luego de la validación el protocolo fue utilizado en la evaluación del perfil de los AS en suero normal y en sueros de pacientes con insuficiencia renal crónica, colestasis del embarazo e hipertiroidismo. Un tratamiento previo de muestra por extracción en fase sólida fue llevado a cabo para limpieza y concentración de los analitos con una recuperación entre 85% y 97%. Este estudio demuestra la utilidad de la CE para el análisis de los AS y por lo tanto es propuesta como técnica alternativa.