Determinación simultánea de nueve hormonas esteroideas en orina utilizando electroforesis capilar

FLOR S.,; CONTIN M.,; MARTINEFSKI M.,; LUCANGIOLI S.,; TRIPODI V.

Buenos Aires

Congreso; 69° Congreso Argentino de Bioquímica; 2011

Las hormonas esteroideas se encuentran  implicadas en diversos estados fisiológicos y fisopatológicos ligadas a la fertilidad, embarazo, menopausia, desordenes metabólicos, cáncer y patología ósea. Se las ha utilizado como terapia de reemplazo, contraceptivos  y también como drogas anabólicas ilegales. Es por ello que su determinación resulta extremadamente importante en el campo del diagnóstico, control de tratamiento, control de calidad de las hormonas administradas y en casos de doping. La determinación confiable de hormonas esteroideas en matrices complejas requiere de procedimientos analíticos capaces de cuantificarlas con alta sensibilidad y especificidad y con la simplicidad requerida para el uso de rutina. Actualmente, existen dos tipos de métodos: inmunológicos y cromatográficos. Los primeros, si bien son selectivos debido a la interacción antígeno-anticuerpo, presentan ciertas desventajas como reactividad cruzada que conlleva a una sobreestimacion cuantitativa, alta variabilidad de lotes e inestabilidad de anticuerpos, falsos positivos y negativos además de ser necesaria la determinación de cada hormona individualmente. Es por ello que los métodos cromatográficos son los de elección para análisis confirmatorios aunque requieran de un paso previo de preparación de muestra.  En la última década, la electroforesis capilar  (CE) se ha posicionado como alternativa cromatográfica dada su sencillez, versatilidad, posibilidad de análisis simultáneo, mínimo requerimiento de muestra y reactivos y bajo costo. En este trabajo, se ha desarrollado y validado un sistema de análisis por CE que permite la determinación simultánea de cortisol, dehidroepiandrosterona, dehidroepiandrosterona sulfato, androstenediona, estrona, estradiol, estriol, progesterona y testosterona en muestras de orina con elevada sensibilidad, exactitud y selectividad y con un simple procesamiento previo de la muestra que lo hace apto para ser utilizado en laboratorios  de mediana complejidad.