Desarrollo de un método por HPLC MS/MS para la obtención del perfil de disolución de MCODs de Levotiroxina.

OLIVERA C; HENESTROSA C; FAVIER S; FLOR S; LUCANGIOLI S.

Congreso; IV Congreso Argentino de Espectrometría de Masa de la sociedad Argentina de Espectrometría de Masa; 2022

El hipotiroidismo es considerado como una de las enfermedades endémicas más comunes,en la que la glándula tiroidea no logra cumplir su función al producir insuficiente T41. Durante laetapa neonatal, en la cual continúa el desarrollo y maduración cerebral, las hormonas tiroideastendrán un rol fundamental. La tiroxina (T4) deriva en triyodotironina (T3) en los tejidos periféricos yésta será la encargada de desencadenar la regulación génica que involucra a proteínas requeridasen la regulación de la respiración celular, termogénesis, crecimiento y diferenciación celular2.La levotiroxina sódica (LTX) actúa como terapia de reemplazo para estos casos donde la secreciónde T4 es inadecuada y cuya función implicaría el normal desarrollo del sistema nerviosocentral eninfantes.Si bien se encuentran disponibles numerosas formulaciones de administración oral de LTX,no existeaúnuna formulación apropiada para la administración de este activo en pacientesneonatos, debido que la dosis utilizada se encuentra enuna concentraciónde10-15μg/kg/día.Como respuesta a esta necesidad,nuestro grupo de trabajo ha desarrolladominicomprimidosorodispersables (MCODs) de LTX,que presentan un tamaño menor a 3 mm y una rápidadisgregación al ser colocados en la cavidadoral,lo que los hace apropiadospara este grupo etarioy permiten una adecuada dosificación mejorado la eficacia terapéutica del tratamiento.Antes de ser administrados,estos minicomprimidos deben cumplir con todas losparámetrosrequeridospor la autoridad sanitaria. Entre estos parámetros se encuentrael perfil y ensayo dedisolución.Dadolas pequeñas concentraciones de LTX utilizadas en los MCODs (10 y 15μg/comp)y a las bajas concentraciones con las que se cuenta una vez disuelto el MCOD en el vaso dedisolución, fue necesario desarrollar y adaptar un método que sea selectivo y altamente sensiblepara poderllevar adelante el ensayo.El análisis se llevó a cabo por un método por HPLC-MS/MS donde la columnacromatográfica utilizada fue Hypersil GOLD C18 (100mm x 2.1 mm, tamaño de partícula de 3μm)de Thermo Scientific. Se empleó un método isocrático Metanol: Ácido fórmico 0,05% (55:45) con unflujo de 0,3 mL/min. La temperatura de la columna se mantuvo a 25°C y el volumen de inyecciónfue de 5μL. La detección se llevó a cabo mediante un espectrómetro de masas en tándem con ESIcomo fuente de ionización. Se trabajó en modo SIM [M+H]+ y en modo SRM (transición777,6731,6) ambos en modo positivo. Parámetros como temperatura de vaporización, gas carrier,temperatura del capilar y energía de colisión, entre otros, fueron optimizados mediante infusióndirecta de 1ppm de estándar.Mediante este método, se logró obtener el perfil de disolución de los MCODs dónde seobservóque antes de los 2 minutos se producíala liberación del 100% de activo.