Desarrollo y validación de un método rápido por HPLC-UV aplicado al análisis de Esomeprazol en una forma farmacéutica líquida de uso pediátrico y un método por HPLC-MS/MS destinado a la evaluación de las sustancias relacionadas

SALVO L.; FLOR S; LUCANGIOLI S.

Congreso; 11° Congreso Argentino de Química Analítica; 2021

En los últimos años se incrementó la incidencia de la enfermedad producida por reflujo gastroesofágico (ERGE) que alcanza hasta el 50% de los pacientes pediátricos de 4 meses de edad. Esta afección luego disminuye, afectando entre el 5% al 10% de los lactantes de un año de edad1. Al día de la fecha el tratamiento de cabecera implica cambios en la dieta, tratamiento farmacológico y en casos más extremas intervenciones quirúrgicas2,3. En el caso de los principales agentes farmacológicos para tratar la ERGE los preferidos son los supresores de ácido, más específicamente los inhibidores de la bomba de protones, que han demostrado mayor eficacia y seguridad en población pediátrica.Evidencia científica respalda el uso de Esomeprazol (ESO) (enantiómero del Omeprazol (OMZ)) demostrando resultados favorables en relación dosis-respuesta en pacientes de 1?24 meses de edad desde 0.25 mg/kg hasta 1 mg/kg.Actualmente solo se encuentran en el mercado formas farmacéuticas sólidas de ESO. Esto dificulta la correcta dosificación y adherencia al tratamiento.Es por ello que nuestro grupo de investigación desarrolló exitosamente una formula liquida oral basada en una suspensión con excipientes aptos de uso pediátrico para resolver la falta de terapéutica actual en el mercado. El objetivo de este trabajo ha sido el desarrollo y validación de 2 métodos por HPLC-UV y HPLC-MS/MS para la determinación de ESO en producto terminado así como también en estudios de estabilidad para la cuantificación de su principal producto de degradación, la sulfona (SFN) con una alta resolución cromatográfica (Rs: 8,6).Para realizar la determinación de contenido de ESO se trabajó con detección UV-Visible a una longitud de onda de 225 nm. Se utilizó una columna cromatográfica AcclaimTM Mixed-Mode HILIC-1 (150 mm x 4.6 mm, tamaño de partícula de 5μm) de Thermo Scientific. El solvente de dilución empleado fue Borato de sodio: Acetonitrilo (70:30). Se empleó un método isocrático de Acetonitrilo:Buffer Fosfatos (30:70) con un flujo de 1ml/min. La temperatura de la columna se mantuvo a 25°C y el volumen de inyección fue de 10μL. La resolución obtenida fue 4 veces mayor a la especificación requerida por la USP para la valoración del OMZ y la SFN.La detección de los productos de degradación se llevó a cabo mediante un espectrómetro de masas en tándem con ESI como fuente de ionización. Se trabajó en modo SIM [M+H]+ y en modo SRM (transición 362,3 → 149.4) ambos en modo positivo. Parámetros como temperatura de vaporización, gas carrier, temperatura del capilar y energía de colisión entre otros fueron optimizados mediante infusión directa de 1ppm de estándar.Ambos métodos desarrollados se validaron en términos de linealidad, especificidad, LOD y LOQ, precisión, exactitud en términos de recuperación y robustez para la determinación de ESO y sustancias relacionadas según la USP 43 .