Desarrollo y validación de un método por HPLC-UV y HPLC MS/MS para la determinación de levotiroxina en MCOD para farmacoterapia pediátrica.

OLIVERA C; HENESTROSA C; FAVIER S; LUCANGIOLI S.; FLOR S

Congreso; 11° Congreso Argentino de Química Analítica; 2021

El hipotiroidismo es considerado una delas enfermedades endócrinas de mayor incidencia. Se tratade una afección enlaglándula tiroides, dondeésta no logra cumplir su funciónalproducirinsuficiente hormona tiroide(T3 y T4). Lalevotiroxina sódica actúa como una terapia de reemplazo para lainadecuada secreción de T4, cuya función implicaría elnormal desarrollo del sistema nervioso central en infantes y la regulación del normal funcionamiento de múltiplesórganos en adultos.Es depúblicoconocimiento que existen numerosas presentacionesde levotiroxina con una amplia disponibilidad deconcentraciones. Sin embargo, la dosis utilizada en neonatos esalrededorde 10-15μg/kgyaún no se encuentracomercialmentedisponible unaformulaciónque seaaplicablea este tipo de población.Para lograralcanzar la eficacia clínica de la levotiroxina, se puede pensar en dos obstáculos a vencer: unainadecuadabiodisponibilidady por el otro, la adherencia auntratamientoalargo plazo. Éste últimose encuentra directamenterelacionado con la aceptabilidad de la formulación por parte del paciente. Es aquí entonces donde los minicomprimidosorodispersables (MCOD) se destacan para su aplicación en pediatría, no sólo por su pequeño tamaño, lo que facilitaríasu administración y sortearía el problema de la deglución, sino también porpermitir adecuar correctamente la dosisnecesaria del paciente impactando enla eficacia del tratamiento.Debido a las pequeñas concentraciones con las que se trabaja en este tipo de comprimidos,es de gran importancia eldesarrollo de metodologías selectivas yaltamentesensibles que sean apropiadaspara la determinación de contenido,sustancias relacionadas y ensayos de disolución aplicados al control de calidad de levotiroxina.Es por ello,que en este trabajo se propone el desarrollo de un nuevo método por HPLC-UV y HPLC MS/MS paraladeterminación de levotiroxina y sustancias relacionadas en MCOD.Si bien existenmétodostradicionalescodificados enlas distintas farmacopeas internacionales, estos métodos no poseen la sensibilidadapropiadapara ser aplicados comométodo de rutina para el control de calidadde los mismos.La columnacromatográficautilizada fue Hypersil GOLDC18 (100mm x 2.1 mm,tamaño de partícula de 3μm) deThermoScientific. Se empleó un método isocrático Metanol:0,05% Ácido fórmico(52:48)con un flujo de 0,4 ml/min.Latemperatura de la columnafue seteadaa 25°Cy el volumen de inyección fue de 5μL.Parael ensayo de valoración y uniformidad de contenidosetrabajó condetección UV-Visiblea una longitud de onda de225 nm.Para el caso del ensayo de disolución, debido a las bajas concentraciones con las que se cuenta una vez disueltoel MCOD en el vaso de disolución (desde 100 a 300 ng/mLtotales), la detección se llevóa cabo mediante unespectrómetro de masasen tándemcon ESI como fuente de ionización.Se trabajó en modo SIM[M+H]+y en modoSRM (transición777,6731,6) ambos en modo positivo. Parámetros como temperatura de vaporización, gas Carrier,temperatura delcapilar y energía de colisión entre otros fueron optimizados mediante infusión directa de 1ppm deestándar.Los métodos desarrollados se validaronen términos delinealidad, especificidad,LOD y LOQ, precisión, exactitudentérminos de recuperacióny robustez para la determinación de levotiroxina y sustancias relacionadassegún laUSP41