DIFERENTES PROPIEDADES DE NEUROTOXINA BOTULÍNICA TIPO A (NTBo) ENTRE CEPAS OBTENIDAS DE SUELOS Y CASOS DE BOTULISMO DEL LACTANTE EN MENDOZA.

CABALLERO, P.; TRONCOSO, M.; PAREJA, V.; FERNANDEZ, R.; SOSA, MA.

Mendoza

Otro; V Foro provincial de investigación para la salud; 2014

Ministerio de salud

El botulismo del lactante (BL) es producida por la toxiinfección de Clostridium botulinum (Cb) tipo A. Considerada enfermedad rara, pero la forma fisiopatológica de mayor incidencia mundial El suelo (Su) es el reservorio del microorganismo anaerobio, esporulado y probablemente la fuente de infección. La NTBo tipo A es un complejo de 900 kDa (exclusivo para este serotipo). En estudios previos hemos observado diferencias morfológicas entre las colonias de estas cepas y comparadas con la prototipo A Hall. El objetivo de nuestro trabajo fue comparar las NTBo obtenidas de las cepas de Su y las provenientes de casos de BL. Se seleccionaron cinco cepas de Su, cinco de BL y tres prototipo A Hall. Se controló toxigenicidad por inoculación IP en ratón blanco de 0,5 ml de medio de cultivo con desarrollo. Para la purificación y análisis de las NTBo de las mismas se produjeron en 200 ml de medio de producción de toxina en anaerobiosis (34ºC, 96 h), se centrifugó y en los sobrenadantes se purificaron por precipitación salina. La potencia tóxica (DL50/ml) se estimó por titulación (Reed y Muench). La actividad específica (AE) (DL50/mg proteína) fue determinada luego de cuantificar la concentración proteica en mg/ml (Lowry) y determinó también la actividad hemaglutinante (AH). Se caracterizó molecularmente por electroforesis en geles de poliacrilamida en condiciones no desnaturalizante. Resultados: La AE varió significativamente (p ≤ 0,001) entre las NTBo de cepas de Su y BL (Su: X= 3,93 DS= 0,59; BL: X= 1,73 DS= 0,44). La actividad de cepas de Su fue similar a la A Hall. Las toxinas de Su y BL mostraron un PM 300 kDa, relacionado con la ausencia de AH, no así la cepa prototipo (600 kDa y elevada AH). Concluímos que las moléculas de NTBo de BL y Su son semejantes, aunque con AE diferente. Esto podría indicar que las cepas y toxinas obtenidas de Su parecen ser de algún modo diferentes a las de BL.