Rap2b y otras proteínas de señalización relacionadas a la autofagia son reclutadas a fagosomas de C.burnetii

MARÍA EUGENIA MANSILLA; MARIA ISABELCOLOMBO

Mendoza

Jornada; XXIII Jornadas de Investigación y V Jornadas de Posgrado Universidad Nacional de Cuyo; 2013

Secretaría de Ciencia, Técnica y Posgrado

Coxiella burnetii, agente etiológico de la fiebre Q, es una bacteria intracellular obligada. Se ha descripto previamente que la vía autofágica y endocítica contribuyen a la maduración de la vacuola replicativa (CRV). De la misma manera, S. aureus induce una respuesta autofágica, que es beneficiosa para el crecimiento bacteriano. Recientemente se ha demostrado en nuestro laboratorio que las proteínas EPAC y Rap2b se reclutan a una fracción de los fagosomas que contienen S. aureus y que este reclutamiento actuaría inhibiendo la respuesta autofágica del hospedador inducida por la presencia de la alfa-toxina de S. aureus. La proteína EPAC (Exchange protein activated by cAMP), un efector que actúan como factor intercambiador de nucleótidos (GEF) para la proteína GTPasa de bajo peso molecular perteneciente a la familia Rap, entre ellas Rap1b y Rap2b. Para determinar si la vía de RAPGEF3/RAP está involucrada en la infección con Coxiella burnetii, analizamos el rol de estas GTPasa en el proceso. Para este fin, células CHO sobrexpresando GFP-Rap2b fueron infectadas con C. burnetii a diferentes tiempos de infección.  Interesantemente, en células que sobreexpresan GFP-Rap2b wt, las vacuolas de C. burnetii resultaron ser más pequeñas a comparación de las células no transfectadas. Además demostramos que ciertas moléculas adaptadoras requeridas para la unión de la proteína autofágica LC3 también son reclutadas a la CRV.  Nuestros resultados indican que proteínas involucradas en distintas vías de señalización relacionada a la autofagia se asocian a la membrana limitante de la vacuola de C. burnetii y que podrían estar controlando respuestas de la célula huésped ante la infección.