Efecto Antifúngico de una Porfirina Anfifílica sobre Candida albicans en Diferentes Medios

CORMICK, M .P.; ÁLVAREZ, M. G., ROVERA, M. Y DURANTINI, E. N.

Rosario

Jornada; XIII Jornadas Argentinas de Microbiología; 2008

XIII Jornadas Argentinas de Microbiología

Las prácticas médicas, que producen una inmunosupresión profunda del paciente, trajeron aparejado un incremento notable en la frecuencia y en la gravedad de afecciones fúngicas. Las infecciones sistémicas emergieron tanto en individuos inmunocomprometidos como inmunocompetentes, convirtiéndose en una causa importante de morbimortalidad. Actualmente, las especies del género Candida están emergiendo como el principal patógeno fúngico nosocomial. La terapia fotodinámica originalmente desarrollada para el tratamiento de tumores, puede ser modificada para la erradicación de microorganismos patógenos. Esta metodología, denominada inactivación fotodinámica, se fundamenta en la acumulación preferencial del fotosensibilizador en las células microbianas. Posteriormente, la irradiación con luz visible conduce a un daño letal en las células fúngicas. En este trabajo fue estudiada la inactivación fotodinámica de Candida albicans sensibilizada por una porfirina anfifílica, 5-(4-trifluorofenil)-10,5,20-tris(4-trimetilamoniofenil)porfirina (TFAP3+). El efecto fotocitotóxico fue evaluado utilizando distintas densidades celulares (106-108 ufc/mL) de C. albicans en medios líquidos. Los cultivos tratados con 5 mM del sensibilizador por 30 min mostraron una incorporación de ~1,4±0,2 nmol/106 células. Estos resultados fueron confirmados por microscopía de fluorescencia utilizando los fluorocromos CMAC y Hoechst 33258, específicos de vacuola y núcleo, respectivamente. Los cultivos (106 ufc/mL) incubados con la porfirina e irradiados con luz visible (30 min) presentan una disminución de las células viables de ~5 log, lo cual representa más de un 99,999% de inactivación, mientras que la sobrevivencia celular aumenta a densidades mayores. Además, los cultivos tratados con TFAP3+ e irradiados, muestran un retardo en la fase lag y ausencia de crecimiento exponencial. Por otro lado, TFAP3+ fue eficiente en la inactivación de C. albicans localizada sobre una superficie. Estudios de microscopía electrónica indican que la integridad de la membrana plasmática de la levadura no se altera por el tratamiento fotodinámico. Por último cabe destacar que la aplicación de TFAP3+ en la inactivación fotodinámica presenta considerable importancia en la desinfección de microorganismos patógenos en una infección localizada sobre una membrana o una superficie sólida, en fluidos biológicos y en tratamiento de aguas residuales. Las prácticas médicas, que producen una inmunosupresión profunda del paciente, trajeron aparejado un incremento notable en la frecuencia y en la gravedad de afecciones fúngicas. Las infecciones sistémicas emergieron tanto en individuos inmunocomprometidos como inmunocompetentes, convirtiéndose en una causa importante de morbimortalidad. Actualmente, las especies del género Candida están emergiendo como el principal patógeno fúngico nosocomial. La terapia fotodinámica originalmente desarrollada para el tratamiento de tumores, puede ser modificada para la erradicación de microorganismos patógenos. Esta metodología, denominada inactivación fotodinámica, se fundamenta en la acumulación preferencial del fotosensibilizador en las células microbianas. Posteriormente, la irradiación con luz visible conduce a un daño letal en las células fúngicas. En este trabajo fue estudiada la inactivación fotodinámica de Candida albicans sensibilizada por una porfirina anfifílica, 5-(4-trifluorofenil)-10,5,20-tris(4-trimetilamoniofenil)porfirina (TFAP3+). El efecto fotocitotóxico fue evaluado utilizando distintas densidades celulares (106-108 ufc/mL) de C. albicans en medios líquidos. Los cultivos tratados con 5 mM del sensibilizador por 30 min mostraron una incorporación de ~1,4±0,2 nmol/106 células. Estos resultados fueron confirmados por microscopía de fluorescencia utilizando los fluorocromos CMAC y Hoechst 33258, específicos de vacuola y núcleo, respectivamente. Los cultivos (106 ufc/mL) incubados con la porfirina e irradiados con luz visible (30 min) presentan una disminución de las células viables de ~5 log, lo cual representa más de un 99,999% de inactivación, mientras que la sobrevivencia celular aumenta a densidades mayores. Además, los cultivos tratados con TFAP3+ e irradiados, muestran un retardo en la fase lag y ausencia de crecimiento exponencial. Por otro lado, TFAP3+ fue eficiente en la inactivación de C. albicans localizada sobre una superficie. Estudios de microscopía electrónica indican que la integridad de la membrana plasmática de la levadura no se altera por el tratamiento fotodinámico. Por último cabe destacar que la aplicación de TFAP3+ en la inactivación fotodinámica presenta considerable importancia en la desinfección de microorganismos patógenos en una infección localizada sobre una membrana o una superficie sólida, en fluidos biológicos y en tratamiento de aguas residuales. Las prácticas médicas, que producen una inmunosupresión profunda del paciente, trajeron aparejado un incremento notable en la frecuencia y en la gravedad de afecciones fúngicas. Las infecciones sistémicas emergieron tanto en individuos inmunocomprometidos como inmunocompetentes, convirtiéndose en una causa importante de morbimortalidad. Actualmente, las especies del género Candida están emergiendo como el principal patógeno fúngico nosocomial. La terapia fotodinámica originalmente desarrollada para el tratamiento de tumores, puede ser modificada para la erradicación de microorganismos patógenos. Esta metodología, denominada inactivación fotodinámica, se fundamenta en la acumulación preferencial del fotosensibilizador en las células microbianas. Posteriormente, la irradiación con luz visible conduce a un daño letal en las células fúngicas. En este trabajo fue estudiada la inactivación fotodinámica de Candida albicans sensibilizada por una porfirina anfifílica, 5-(4-trifluorofenil)-10,5,20-tris(4-trimetilamoniofenil)porfirina (TFAP3+). El efecto fotocitotóxico fue evaluado utilizando distintas densidades celulares (106-108 ufc/mL) de C. albicans en medios líquidos. Los cultivos tratados con 5 mM del sensibilizador por 30 min mostraron una incorporación de ~1,4±0,2 nmol/106 células. Estos resultados fueron confirmados por microscopía de fluorescencia utilizando los fluorocromos CMAC y Hoechst 33258, específicos de vacuola y núcleo, respectivamente. Los cultivos (106 ufc/mL) incubados con la porfirina e irradiados con luz visible (30 min) presentan una disminución de las células viables de ~5 log, lo cual representa más de un 99,999% de inactivación, mientras que la sobrevivencia celular aumenta a densidades mayores. Además, los cultivos tratados con TFAP3+ e irradiados, muestran un retardo en la fase lag y ausencia de crecimiento exponencial. Por otro lado, TFAP3+ fue eficiente en la inactivación de C. albicans localizada sobre una superficie. Estudios de microscopía electrónica indican que la integridad de la membrana plasmática de la levadura no se altera por el tratamiento fotodinámico. Por último cabe destacar que la aplicación de TFAP3+ en la inactivación fotodinámica presenta considerable importancia en la desinfección de microorganismos patógenos en una infección localizada sobre una membrana o una superficie sólida, en fluidos biológicos y en tratamiento de aguas residuales.