Actividad Fotodinámica de un Nuevo Sensibilizador Derivado de Porfirina-C60 y sus Consecuencias Biológicas en una Línea Celular de Carcinoma Humano

M.G.ALVAREZ,C.PRUCCA,M.E.MILANESIO,E.N.DURANTINI,V.RIVAROLA

Villa Giardino

Jornada; Sociedad de Biología de Córdoba, XV Jornadas Científicas; 2005

  La terapia fotodinámica (TFD) se basa en la acumulación preferencial de un fotosensibilizador en el tejido tumoral. La subsiguiente activación local del agente por la luz visible induce la destrucción tumoral. Actualmente varias clases de sensibilizadores están siendo utilizados en la clínica o en estados de desarrollo en medios biológicos. El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos fotodinámicos por primera vez de P-C60, una díada con alta capacidad para formar estados de separación de cargas fotoinducido, en una línea celular de carcinoma humano (Hep-2). P-C60 es inocua en la oscuridad hasta la concentración 1 mM y 24 horas de incubación. Este sensibilizador se incorpora rápidamente (<4 h) en las células y alcanza un valor de saturación entre las 4 y 24 h (~1,5 nmol/106 células). La sobrevivencia celular después de la irradiación fue dependiente de la dosis de luz utilizada. Un alto efecto fotocitotóxico (80%) fue observado con 54 Jcm-2. Además la díada mantiene una fotoactividad alta aún bajo condiciones de atmósfera de argón, demostrando la implicancia de dos mecanismos oxidativos en el fotodaño de las células. Los cambios en la morfología celular fueron analizados usando microscopía de fluorescencia. La irradiación con 54 Jcm-2 produjo la fragmentación nucleosomal de la cromatina, característica de la apoptosis. Estos resultados fueron confirmados a través de la electroforesis en gel de agarosa, mostrando una fragmentación internucleosomal de la cromatina. Estos estudios muestran que la díada P-C60 ofrece una arquitectura molecular imponente para agentes fototerapéuticos con aplicaciones potenciales en la inactivación celular por TFD.