Fotoinactivación de Candida albicans inducida por 5,10,15,20-tetrakis[4-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)fenil]porfirina y su derivado tetracatiónico

EZEQUIEL D. QUIROGA, S. JIMENA MORA, M. GABRIELA ALVAREZ, M. ELISA MILANESIO, EDGARDO N. DURANTINI.

Córdoba

Congreso; II Grafob: Segunda Reunión de Fotobiólogos Moleculares Argentinos; 2013

En las últimas décadas, la incidencia de infecciones fúngicas se ha incrementado considerablemente por el uso frecuente de procedimientos invasivos, medicación inmunosupresora y antibióticos de amplio espectro. Así, la resistencia dela Candida albicanses cada vez mayor contra antimicóticos tradicionales derivados de azoles [1]. Por lo tanto, es necesario desarrollar terapias alternativas para el tratamiento de la candidiasis. Unamodalidad prometedora es la inactivaciónfotodinámica (PDI) de los microorganismos, que utiliza la combinación de luz, fotosensibilizador y oxígeno para conseguir un efecto citotóxico en las células [2].En este trabajo se estudió el efecto fotodinámicas de 5,10,15,20-tetrakis[4-(3-N,N-dimetilaminopropoxi)fenil]porfirina (TAPP) y 5,10,15,20-tetrakis[4-(3-N,N,N-trimetilaminopropoxi)fenil]porfirina (TAPP4+) en diferentes medios. El rendimiento cuántico de producción de O2(1Dg) (FD) se determinó en N,N-dimetilformamida (DMF) dando valores de 0,53 y 0,49 para TAPP y TAPP4+, respectivamente. En agua los valores de FD fueron de 0,31 para TAPP y 0,38 para TAPP4+. Por otra parte, ambos fotosensibilizadores producen la fotooxidación eficiente del aminoácido L-triptófano. La incubación de C. albicans con 5 µM de porfirina resulta en una incorporación intracelular de 1,0 y 1,5 nmoles/106 células para TAPP y TAPP4+, respectivamente. El análisis celular mediante microscopia de fluorescencia permitió estudiar la distribución intracelular de ambas porfirinas. TAPP4+ esta sustituida por cuatro grupos con carga positiva intrínseca, mientras que los grupos amino alifáticos de TAPP pueden protonarse a pH fisiológico. Las cadenas alifáticas le confieren movilidad a los grupos catiónicos, lo que permite una interacción mejor con las células. La irradiación de los cultivos con luz visible por 30 min produce una disminución en la viabilidad celular de ~5 log con respecto al control (106 células/ml). Además, la PDI fue efectiva para C. albicans creciendo en colonias sobre una superficie y no se observó crecimiento hasta 6 días después de realizado el tratamiento. Estudios del mecanismo de acción fotodinámico indicaron que el fotodaño celular es causado principalmente por la participación del O2(1Dg). Estos resultados establecen que las porfirinas TAPP y TAPP4+ son fotosensibilizadores apropiados para ser aplicados en la PDI de C. albicans creciendo en medios líquidos o sobre superficies.