Protoporfirina IX sintetizada a partir del Ácido 5 Aminolevúlico. Su Efecto Fotodinámico sobre Cultivos Celulares

ÁLVAREZ, M. G.; LACELLI, M. S.; RIVAROLA, V.; BATLLE, A.; FUKUDA, H.

Buenos Aires

Jornada; XXII Jornada de Oncología del Instituto “Angel H. Roffo; 2006

La terapia fotodinámica (TFD) es una modalidad terapéutica en el tratamiento de neoplasias que involucra el pretratamiento del tejido tumoral con un fotosensibilizador (FS), el que al ser expuesto a la luz induce mediante la  liberación de oxígeno molecular singlete (1O2), el fotodaño y la consecuente destrucción del tejido tumoral. El ácido 5 aminolevúlico (ALA) es el precursor biológico del FS protoporfirina IX (PPIX) en el camino de la biosíntesis del hemo. ALA-TFD se aplica actualmente en urología, gastroenterología y dermatología. El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos fotodinámicos de ALA-PPIX sobre cultivos de células de adenocarcinoma mamario humano (MCF-7c3) y de laringocarcinoma humano (Hep-2). En ambas líneas celulares ALA es inocuo en la oscuridad hasta una concentración 1mM y 24 horas de incubación y se acumula de manera proporcional a la concentración y al tiempo de incubación, llegando a la saturación a las 5 horas en ambas líneas celulares (Hep-2: 3.2 μg PPIX/106 céls, MCF-7c3: 8,5 μg PPIX/106 céls). Los estudios de localización celular demuestran que la PPIX se localiza tanto en el citoplasma como en el núcleo en las células MCF-7c3 y en área perinuclear principalmente en los lisosomas en las células Hep-2. La acción combinada de ALA-PPIX (1mM) y la luz visible (54 Jcm-2) induce, según los ensayos de índice de supervivencia (medidos por MTT), una disminución significativa de la viabilidad en células MCF-7c3 y en las células Hep-2 (90% y 40% respectivamente). Por tinciones con Hoechst 33258 de los cultivos celulares tratados con ALA-PPIX (1mM) se vio que una irradiación de 54 Jcm-2 induce el valor máximo de índice necrótico (73%) en células MCF-7c3 y un valor máximo apoptótico (34%) en células Hep-2. Estos resultados fueron confirmados por el ensayo TUNEL. Estos estudios indican la utilidad de ALA-PPIX como agente fototerapéutico para la inactivación de células tumorales mediante TFD.