Estudios in vitro e in vivo de nuevos fotosensibilizadores de utilidad en Terapia Fotodinámica

E.I.YSLAS,M.G.ALVAREZ,N.RUMMIIE VITTAR,F.MORÁN,A.BONANCEA,M.MONETTI,M.BERTUZZI,E.DURANTINI,V.RIVAROLA

Río Cuarto

Jornada; Seminario Académico Científico 2001; 2001

  Las macromoléculas derivadas de porfirinas ocupan un lugar central en la química bioorgánica y presentan importantes aplicaciones como agentes para tratamientos de enfermedades neoplásicas Los estudios actuales en Terapia Fotodinámica, están centrados en la caracterización de nuevas drogas fotoactivables. En la presente comunicación se describen los efectos de 5,10,15,20-tetrakis(4-metoxifenil)porfirina (TMP) y 5-[4-N-(2´,6-dinitro-4´trifluormetilfenil) aminofenil)]-10,15,20-tris (2,4,6-trimetoxifenil)porfirina (CF3), sobre cultivos celulares y animales de laboratorio. En la oscuridad, TMP no altera la supervivencia de los cultivos celulares. La irradiación causó la muerte celular en relación con la dosis, por apoptosis y por necrosis Los ensayos de supervivencia celular realizados sobre células Hep-2 han permitido comprobar que en ausencia de luz, CF3 no afecta la viabilidad celular con tiempos de incubación cortos (3h) ni largos (24h) de las tres concentraciones estudiadas (10-5M, 10-6 y 5x10-6 M). Por el contrario, la acción combinada de CF3 y luz visible induce una disminución de la supervivencia celular, dependiente de la concentración de porfirina utilizada y de la dosis de luz. Al incubar las células con CF3 1X10-5 durante 24 h, el análisis morfológico mediante tinción con azul de toluidina y Hoechst-33258, reveló un mecanismo de muerte celular distinto, en función del tiempo de irradiación empleado: 15 min de irradiación produjo fragmentación de la cromatina que caracteriza a la apoptosis. Las células que habían recibido una irradiación de 30 min, mostraban la morfología típica de la muerte celular por necrosis. Los resultados obtenidos sugieren que la porfirina CF3 reúne interesantes propiedades fotobiológicas. En las ratas, ningún efecto de TMP  puede ser observado en el filtrado glomerular, en la actividad alanina aminotransferasa, en los valores del hematocrito y en las proteínas plasmáticas. El fotosensibilizador se acumula en el bazo, en el hígado y esta ausente en el cerebro. 80% de TMP es transportado unido a las proteínas HDL y el resto, a las proteínas LDL. Los tumores extraídos de ratones, incubados con porfirinas e irradiados muestran una alta mortalidad con respecto a los controles no irradiados. Además se realizaron estudios in vivo utilizando ratones Balb/c en los que se determinó la biodistribución  de CF3 (10mg/Kg) y su efecto en cortes histológicos de órganos afectados. Se observan leves lesiones luego de 7 días de tratamiento, por lo que se concluye que se debe intentar la utilización de la droga en los tumores, inyectando la porfirina sobre el tumor y que TMP muestra una actividad fototerapéutica potencial alta.