Inhibición de la actividad antibiótica de Microcina J25 por amidación y carbetoxilación del péptido nativo

BELLOMIO, AUGUSTO; RINTOUL, MARÍA R.; FARÍAS, RICARDO N.; MORERO, ROBERTO D.

Mendoza, Argentina

Congreso; XXXIV Reunión Anual de Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular; 1998

Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular

Las microcinas comprenden un grupo de moléculas peptídicas de origen bacteriano que tienen capacidad para interferir el crecimiento de otras bacterias filogenéticamente relacionadas. Microcina J25 (MccJ25) es un polipéptido circular de 21 aminoácidos (-Gly Gly Ala Gly His Val Pro Glu Tyr Phe Val Gly Ile Gly Thr Pro Ile Ser Phe Tyr Gly-). En la presente comunicación se prepararon dos análogos de MccJ25 por modificación de los aminoácidos Glu e His de la MccJ25. El derivado con el grupo carboxilo amidado (MccJ25-CONH-CH2-COOCH3) se obtuvo por reacción con 1-etil 3-dimetil amino propil carbodiimida en presencia de glicil metil ester. El N-carbetoxi histidil derivado (MccJ25N-COOC2H5) se preparó por reacción con dietil pirocarbonato. En este caso el progreso de la reacción fue seguido midiendo aumento de OD a 240 nm. Los análogos fueron aislados por HPLC sobre una columna mBondapack C18 eluyendo con gradiente de acetonitrilo-agua (sin TFA). El derivado carbetoxilado MccJ25N-COOC2H5 no sufre modificaciones en su carácter hidrofóbico, mientras que el análogo MccJ25-CONH-CH2-COOCH3 aumenta significativa-mente este carácter. Esta característica puede deducirse fácilmente por el comportamiento que estos compuestos poseen al ser eluídos por HPLC. La actividad antibiótica en UA/ml se determinó por el método de la dilución crítica sobre E. coli W3110 o de Salmonella newport. Ambos análogos pierden prácticamente el 90 % su actividad antibiótica. Estos resultados indican la gran importancia de la carga negativa del grupo R del glutamato y del anillo imidazólico de la histidina sobre el efecto biológico de MccJ25.