Cultivo in vitro de protoescólices de Echinococcus granulosus de origen bovino

ELISSONDO, M.C; DOPCHIZ, M.C.; BRASESCO, M. & DENEGRI, G.

Neuquen

Jornada; VI Seminario Patagónico de hidatidosis; 2002

Filial Argentina de la Asociación Internacional de Hidatidología

Los modelos de cultivo in vitro fueron originalmente desarrollados por Smyth (1962, 1967). El modelo en dirección vesicular fue puesto a punto por el Grupo de Alcalá (Casado et al., 1986; Casado & Rodriguez-Caabeiro, 1988, 1989; Rodriguez-Caabeiro & Casado, 1988; Denegri et al., 2002).           El objetivo de este trabajo fue la puesta a punto de un modelo experimental para el cultivo in vitro de protoescólices y microquistes Echinococcus granulosus.           Se utilizaron protoescólices extraídos de quistes hidatídicos localizados en hígado y pulmón de bovinos. Los quistes se punzaron y se extrajo la arenilla hidatídica. Los protoescólices se lavaron varias veces con PBS, se comprobó la vitalidad con azul de metileno y se distribuyeron en Tubos Leiihgton a razón 0,1 ml de protoescólices por cada 10 ml de Medio 199. Se adicionó al medio suero fetal bovino (20%) y se suplementó con glucosa y antibióticos. El desarrollo se siguió diariamente bajo microscopio invertido y se apuntaron las modificaciones morfológicas observadas. Se estableció el tiempo de evolución en días hasta la formación de microquistes (Casado & Rodriguez-Caabeiro, 1988). En los cultivos in vitro se comprobó a partir del día 14 la aparición de la membrana laminar como una fina membrana en uno de los extremos de los protoescólices. Alrededor del día 21 se observaron algunos protoescólices con un tamaño mucho mayor con la membrana laminar completa y  los 34 días se observaron microquistes desarrollados. Se ha comprobado la validez del modelo de cultivo in vitro en dirección vesicular, acortando los tiempos de evolución lo que permitirá evaluar la actividad antihlemíntica de diferentes fármacos y estudiar sus mecanismos de acción en espacios de tiempo breves.