PARTICIPACIÓN DEL RECEPTOR mPRα EN LA RESPUESTA QUIMIOTÁCTICA MEDIADA POR LA PROGESTERONA

TRILLINI, NATALIA ANDREA; GUIDOBALDI, HA

Cordoba

Congreso; XXII Jornadas Científicas Sociedad de Biología de Córdoba; 2019

Sociedad de Biología de Córdoba

La fecundación en mamíferos es un evento complejo que culmina en la fusión de las gametas. El espermatozoide (zoide) debe completar una serie de cambios biofísico-químicos (capacitación) para poder encontrar el ovocito, atravesar las cubiertas que lo rodean y fecundarlo. Además de su propia movilidad, los zoides se valen de algunos mecanismos de orientación celular que facilitan el encuentro de las gametas, tal como la quimiotaxis; esta es la orientación del movimiento del zoide capacitado siguiendo un gradiente de concentración de un atractante. Las células del cumulus que rodean al ovocito, secretan progesterona (P4) que actuaría como quimioatractante fisiológico. La detección del gradiente de P4 estaría mediada por receptores, y por ser una respuesta celular rápida, estos se ubicarían en la membrana plasmática. En zoides se han descripto algunos receptores de membrana de P4, como el PGRMC1, CatSper y el mPRα. Pero aún no se ha identificado si alguno de estos participa en la respuesta quimiotáctica. De estos, el mPRα es una proteína de siete pasos transmembrana asociado a proteína G y localizado en la pieza intermedia en espermatozoide humano. Además, su estructura es similar a la de los receptores de quimioquinas o compuestos odoríferos (lyral), que también inducen quimiotaxis. Por lo tanto, nuestro objetivo fue evaluar si el mPRα participa en la respuesta quimiotáctica mediada por la P4 en mamíferos. Primero, evaluamos si la activación del receptor mPRα induce la quimiotaxis espermática. Para ello, evaluamos la respuesta quimiotáctica de zoides humanos capacitados mediante el Ensayo de Selección Espermática (ESE). Como atractante se utilizaron distintas dosis (pM a μM) de una progestina sintética, 10-etenil-19-norP4 (19-CH2-P4), un agonista selectivo de alta afinidad del mPRα, y se realizaron controles de quimiotaxis positivos de P4 (10pM) y negativos (medio BWW). Las distintas concentraciones de la progestina indujeron una respuesta quimiotáctica en forma de campana, observándose la máxima respuesta a 1pM, sin que afectara la movilidad celular ni indujera cambios en el tipo de movimiento. Además, se verificó que sólo los zoides capacitados respondieron quimiotácticamente. Luego, para determinar si el mPRα es activado por la P4, se realizó un ensayo de contragradiente empleando el ESE, usando un gradiente de P4 10pM como atractante y distintas concentraciones de 19-CH2-P4 como contragradiente; cumpliendo la función de inhibidor de la quimiotaxis hacia P4. Los contragradientes de la progestina inhibieron la respuesta quimiotáctica hacia la P4 de manera dosis dependiente. Además, se verificó que la progestina induce la respuesta quimiotáctica, a través de las mismas vías de señalización que la P4, como la tmAC/AMPc y.mediante la movilización de calcio intracelular. En conjunto, estos resultados sugieren que el mPRα participaría en la respuesta quimiotáctica mediada por la progesterona en mamíferos.