Nivel de especies reactivas en la población de espermatozoides separados con el “Ensayo de Selección Espermática”

GATICA, LV; UÑATES, DR; GUIDOBALDI, HA; GIOJALAS, LC

Congreso; V Congreso ANDRO - VI Congreso Argentina de Andrología; 2012

Asociación Iberoamericana de Sociedades de Andrología

Introducción: La fecundación está asociada al buen estado fisiológico de los espermatozoides (E), el cual involucra la capacitación espermática y un bajo nivel de oxidación celular, siendo las especias reactivas derivadas del anión superóxido (O2 –) y del óxido nítrico (ON) las responsables del estrés oxidativo. Un mecanismo fisiológico que permite la selección de los E capacitados (cap) es la orientación de su movimiento siguiendo un gradiente de concentración de una molécula atractante, fenómeno denominado quimiotaxis. En nuestro laboratorio hemos desarrollado el “Ensayo de Selección Espermática” (ESE), que permite seleccionar E cap mediante quimiotaxis hacia la Progesterona (P). Objetivo: Evaluar el nivel de ON y de O2– en la población espermática seleccionada con el ESE, y su correlación con el estado capacitado. Metodología: La muestra de E preparada bajo condiciones capacitantes, se expuso a un gradiente pM de P en la cámara del ESE. En la población espermática antes de aplicar el ESE y en la recuperada al final del ESE, se determinaron los siguientes parámetros: % de E con ON y O2–, mediante el uso de marcadores fluorescentes (DAF-2 DA y DHE, respectivamente), y % de E cap mediante las técnicas de CTC y la inducción de la reacción acrosómica con A23187 y el marcador Coomasie Blue. El nivel de variación en estos parámetros se determinó luego de aplicar el ESE mediante el cálculo del Índice de Variación (IV%E). Resultados: Después de aplicar el ESE en presencia de P, se observó una disminución significativa en el IV%E conteniendo ON y O2 –, mientras que el IV%E cap aumentó significativamente (p< 0.05). Discusión: Estos resultados preliminares muestran que la población espermática separada con el ESE en presencia de progesterona permite seleccionar E en su mejor estado fisiológico, aquellos que están capacitados y con menor contenido de especies reactivas.