Análisis in vitro de la recombinación entre los subtipos B y F del virus de inmunodeficiencia humana tipo I (HIV-1)

RODRIGUEZ RODRIGUES, C; SALOMÓN, H; CAROBENE, M

Paraná, Entre Ríos, Argentina

Congreso; 1º Congreso Nacional de SIDA; 2007

ANALISIS IN VITRO DE LA RECOMBINACION ENTRE LOS SUBTIPOS B Y F DEL VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA TIPO I (HIV-1).   C. Rodríguez Rodrígues, H. Salomón y M. Carobene Centro Nacional de Referencia para el SIDA,  F. de Medicina, UBA.   Objetivo: Estudiar in vitro el fenómeno de recombinación entre subtipos de HIV-1 (B y F), analizando comparativamente las formas recombinantes seleccionadas con los recombinantes naturales circulantes. Materiales y Métodos: Se utilizaron cepas NL4-3 (B) y 93BR020.1 (F) para la infección dual de células MT2 en condiciones y tiempos controlados. La detección de formas virales recombinantes se realizó mediante PCR subtipo-específica dirigida a LTR y Tat. Los productos recombinantes fueron clonados y secuenciados. Simplot y Mega3.1  fueron utilizados para el análisis de secuencia. Resultados: La detección de formas recombinantes en las zonas en estudio se produjo 7 días post-infección. Las secuencias obtenidas evidenciaron variaciones asociadas al fenómeno de recombinación entre los subtipos parentales, involucrando zonas de LTR como TAR (elemento de respuesta a la transactivación), DIS (iniciador de dimerización) , y de la proteína de Tat (exon 1) importantes para la replicación viral. Conclusiones: El análisis de la recombinación in vitro entre los subtipos B y F indican que las regiones estudiadas serian puntos calientes de recombinación tanto in vivo como in vitro, y sostienen la hipótesis de un proceso rápido de generación de variabilidad y con consecuencias biológicas importantes semejantes a las observadas en las variantes virales recombinantes halladas en la población infectada.